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Q:RNA投入量是多少?投入的是什么RNA?能否将随机引物换成oligo dT?

1. RNA投入量:本产品适用于Total RNA 500 pg - 1 μg的投入量。2. 投入的RNA类型:可投入总RNA(Total RNA)。3. 引物替换建议:不建议将随机引物替换为oligo dT引物,可能会导致产量降低。若需使用oligo dT引物,需先分离mRNA后再进行逆转录反应。

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Q:可以使用12603ES直接从组织裂解液中分离mRNA吗?

不可以。12603ES试剂盒的设计用途为从总RNA中分离mRNA,若直接使用其从组织裂解液中分离mRNA,裂解液中的组分及杂质可能会对mRNA的分离效果产生干扰。建议先按照标准流程对组织裂解液进行预处理(如去除基因组DNA、沉淀蛋白等),或选择适用于直接从裂解液中分离RNA的试剂盒。

RNA建库 👁 66 🔖 12603ES, 分子类, NGS, RNA建库系列
Q:12257去除rRNA有残留?

针对12257产品去除rRNA过程中可能出现的残留问题,建议从以下两方面排查和优化:(1)RNase H Buffer与RNase H酶混合液的稳定性较差,建议在RNase H消化步骤中单独添加酶或现配现用混合液(配置完成后10分钟内使用完毕);(2)若混匀不彻底可能导致rRNA残留,建议使用振荡器…

RNA建库 👁 67 🔖 12257ES, 分子类, NGS, RNA建库系列
Q:mRNA 文库构建分为链特异性文库和常规文库,这两个文库的区别是什么?

mRNA文库构建中,链特异性文库与常规文库的核心区别在于第二条链合成时所使用的核苷酸类型:(1)常规mRNA文库:在合成第二条链时加入dTTP,(脱氧胸苷三磷酸);(2)链特异性 mRNA文库:在合成第二条链时加入dUTP(脱氧尿苷三磷酸)。通过此差异,链特异性文库可在文库构建过程中保留RNA的原始…

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