针对12199ES、12200ES、12201ES建库试剂盒,接头搭配选择如下:(1)完整接头(Cat#12615-12618):适用于单端建库,支持48个index;若客户需更多index,可咨询技术支持。(2)单端短接头(Cat#12611-12612):适用于单端建库,支持96个index。(…
DNA建库FAQ
12197与12199均为机械法DNA建库相关产品,二者的主要区别在于建库起始量不同:(1)12197建库起始量为100pg - 1μg;(2)12199建库起始量为500pg - 1μg。
本一步法建库试剂盒具有以下优势:(1)引入高质量片段化酶,无需复杂的片段化过程,可实现稳定的片段化效果;(2)搭配强扩增效率的高保真酶,能极大提升文库转化效率与扩增效率;(3)针对不同GC 含量的样本,均可获得优异的测序结果,文库覆盖度高、均一性好,、偏好性低,使建库过程更加简便。
华大智造(MGI)的建库接头主要有两种编号体系:1-128 及 501-596。关于接头的具体使用要求,建议您参考华大智造官方发布的“Adapter 使用说明”文档;若有进一步疑问,可咨询本公司技术支持。此外,华大智造明确声明:由于两种接头的设计工艺存在差异,禁止混用,否则可能导致测序数据无法正常拆…
13341ES是用于单端Barcode文库环化的试剂。若文库为双端Barcode,可选用13340ES进行文库环化操作。
13577ES与12197ES的主要区别在于适用场景:13577ES更适合FFPE样本的机械法建库、cfDNA样本的直接建库及NIPT领域的血浆样本建库,且支持PCR-Free文库构建。
12901ES 为 T4 DNA 聚合酶与 DNA 聚合酶 I 存在以下差异:(1)酶活性差异:该酶具有 5'→3' DNA 聚合酶活性和 3'→5' 核酸外切酶活性,且活性均高于 DNA 聚合酶 I;(2)5'→3' 核酸外切酶活性缺失:T4 DNA 聚合酶不具备 5´'→3´' 核酸外切酶活性,…
12903(末端修复酶)具有以下酶活性:(1)5'-3'外切酶活性;(2)5'-3'聚合酶活性;(3)3'-5'外切酶活性)。
产品12907ES中包含的是随机内切酶,该酶作用于双链DNA(dsDNA),产生的末端为黏性末端。本产品暂不支持直接作用于RNA。
可以使用单酶(Cat#12907ES)搭配机械法流程建库试剂盒(如Cat#12199)进行建库。但本公司建议购买完整试剂盒(Cat#12204),该试剂盒经过流程优化,可获得优异的建库表现。若选择使用Cat#12907ES搭配其他品牌建库试剂盒,建议在片段化后先进行纯化,再衔接其他品牌建库试剂盒。
片段化酶切模块(货号:12907ES)可适用于 MGI 平台,具体使用需遵循该平台的标准操作流程。
若使用本公司gDNA片段化相关产品(如酶切试剂)按说明书酶切条件(20 min)仍出现酶切不完全的情况,可优先考虑以下因素:(1)DNA质量问题:Input DNA中若含有高浓度金属离子螯合剂(如EDTA)或其他盐离子,可能会抑制酶活性,建议将DNA稀释至ddH₂O或不含EDTA 的 10 mM T…
在酶切反应中,即使酶切时间较短,仍可能出现过度酶切现象。例如,以300 bp 插入片段的白细胞基因组DNA(gDNA)为例,若采用30℃、10 min的酶切条件,可能会出现过度酶切现象。本产品建议在进行酶切时,需根据不同样本的基因组DNA大小调整反应条件。对于白细胞等基因组DNA相对较小的样本,应适…
本产品具备小片段保护机制,在常规实验条件下,最低可实现约150 bp的片段切割。
本产品主要应用于以下领域:(1)多基因分型,可用于复杂基因组中多个目标基因的检测与分型分析;(2)食品病原微生物检测,能够快速、准确地识别食品中潜在的致病微生物,保障食品安全。
本产品的保存温度为2~8℃,不建议在-20℃条件下保存,以确保试剂性能的稳定性和有效性。
13321ES和13322ES的主要区别在于适用的样本起始量:(1)13321ES适用于样本起始量为10 ng - 1 μg的场景;(2)13322ES适用于样本起始量为500 pg - 1 μg的场景。
本产品的片段化效果与样本量和酶切时间相关,具体表现为:(1)酶切时间越长,片段化后的产物长度越短;(2)产品设置了小片段保护机制,最短可达到100~150bp左右;(3)建议按照说明书推荐的样本投入量进行操作,若超出推荐范围,需自行摸索合适的反应体系。
酶切法片段化后,若片段大小与预期不符,可从以下方面排查:(1)样本质量:需确认样本纯度是否正常,若样本中杂质(如蛋白、盐离子等)较多,可能会影响酶活性,进而导致片段化效果异常。(2)操作因素:检查酶切反应的时间把控是否准确,过度酶切或酶切不充分均可能导致片段大小偏离预期。建议片段化体系在冰上配置,以…
12204ES 为完整的建库试剂盒,包含片段化模块、连接模块及扩增模块,适用于从起始样本到完成文库构建的全流程需求。12609ES 为片段化模块,可同时完成样本的片段化、末端修复及加 A 流程,需配合其他模块(如连接、扩增模块)共同使用以完成文库构建。12907ES 为单酶(原料酶),仅用于 DNA…