本产品不带标签。
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可特异性地将pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST 标签进行分离。
一般-80℃长期储存。-20℃的储存时间也不超过 6 个月。
100mM ZnCl2、4mM AEBSF 和 100μM Chymostatin。
在实际操作中,建议酶用量 1:25-1:100U/μg 融合蛋白。
Fe2+,Fe3+,Zn2+,Cu2+,肝素,金精三羧酸,硫酸,硝酸,乙酰化透明质酸,硫酸纤维素酯,胆汁等。
不建议,一般-20℃保存。
可以,用PBS现配现用即可。
该产品储存液不稳定,使用时建议现配现用。
我们只能保证我们配方(含77mM氯化钠和0.01%BSA的磷酸盐buffer)是可以的,商业化的PBS一般氯化钠浓度会高一些,这个不有确定,没有测试过效果。
当用于肿瘤组织消化时,推荐工作浓度≥100 U/ml(以400 U/mg为例,浓度为0.25 mg/ml),但不同批次对应的酶活会有不同,可提供批次号对酶活性数据进行确定。另可参考已发表的文献PMID:32001695(1 mg/ml),PMID:33625842(0.2 mg/ml)。
该产品分子量为27.6 kDa。
带his标签,酶切后可用Ni去除。
生理盐水即可。
一般在 37℃下溶解,溶解时温度不宜过低,在 4℃条件下以及不含盐的溶液中会难以溶解。
不耐热,纤维蛋白原溶液在 50℃以上变性,因此加热温度不宜超过 50℃。
配制成溶液后稳定性不好,建议现用现配;若一次用不完,建议按照实验计划,称量粉末配制。
蛋白酶抑制剂PMSF及PMSF的无毒替代物,AEBSF 可能也会有影响, 请客户提取蛋白时最好不加这类抑制剂。可用20138ES,这款产品不含PMSF.
Buffer 1(10×)组分:5% SDS; 400 mM DTT;这两个成分在低温条件下都比较容易析出,内部做了测试的,不溶解的情况下,混悬均一吸取不影响反应效果。或选择在 50℃ 10min复溶后使用,也不影响酶活。
2-8℃保存;但配好的液体,请于≤-60℃保存。