抑肽酶为白色或米白色干燥粉末,易溶于水、生理盐水,不溶于乙醇、丙酮、乙醚。
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SDS 是一种阴离子去垢剂,常用于从蛋白质中分离核酸,从宿主细胞中脱落某些病毒;蛋白电泳试剂,也可用于质粒提取等实验。
SDS 是阴离子表面活性剂,常用于蛋白质和类脂类的电泳分离。当其与蛋白质混合, 质量比达到 1.4:1 时,SDS 能破坏蛋白质分子间以及其他物质分子间的非共价键,使蛋白质的构象发生变化,继而使蛋白质变性解离成单一亚基,从而降低或消除了各种蛋白质分子间的天然电荷差异。电泳常用 10%的 SDS 作为…
SDS 可以迅速破坏组织结构,抑制 RNase 和脱氧核糖核苷酶(DNase)活性,所以 SDS 也是核酸纯化试剂的关键组分。通常使用 10%或者 20%的 SDS 储备液,SDS 的工作浓度是 0.1-0.5%。
SDS 低毒,大鼠经口半数致死量(LD50)为 1288 mg/kg,有刺激性。操作时建议佩戴口罩、手套并在通风处进行,避免吸入粉尘及皮肤直接接触;配制溶液时若产生粉尘,注意防护。室温运输和保存即可,但需干燥保存(防潮结块)。
Triton X-100 是一种非离子表面活性剂,在分子生物学及免疫学中用于促进脂质和蛋白质的溶解,可用于多种实验,如细胞裂解、蛋白提取、酶类储存液以及其他蛋白稳定液的配制、ICC/IHC 等。
该产品是翌圣 RIPA 系列中裂解强度最高的一档。针对胞膜、胞浆、胞核成分均强裂解。
主要成分为 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS,均为蛋白抑制剂, 可有效抑制蛋白降解。
亲和纯化凝胶变性洗脱后不能重复使用。
按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽(货号:60342ES)即可,配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致,部分谷胱甘肽溶解后ph会偏酸。
不可以,使用前后均要煮沸,并做好检漏工作。具体方法请严格参照说明书。
不需要了,预装柱中含有填料。
可能是样品或 buffer 中有气泡;建议样品和buffer 进行脱气。
可以。尽量用于同种样品的纯化,纯化过程蛋白样品会与耗材接触,还是会有非常微量的残留,如果不考虑这类微量残留的话,柱管可以用于不同填料的装填和纯化。
多用于亲和层析介质的装填。不需要搭配纯化仪使用。
孔筛的筛板无需区分正反面。
柱管由聚丙烯(PP)注塑而成,筛板的材质是UHWMPE.
装柱流程如下:第一:准备重力柱;第二:将白色小垫片塞入重力空柱中,垫片可用20%乙醇湿润;第三:首先确认需要装入填料体积,移液枪将填料和缓冲液一起加入重力柱中;第四:将上垫片塞入填料上面固定填料(此步骤也可以不做),然后利用平衡液平衡填料。
可能原因如下:1.样品中含高浓度的核酸,建议延长破碎时间直至粘度降低,或添加DNaseI;2.缓冲液太黏稠,有机试剂或蛋白稳定试剂(如甘油等)可能会引起反压增高, 降低操作流速。3. 填料被堵塞,裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上样前最好用 0.22µm 或0.45µm 滤膜过滤,或离心去除。
琼脂糖树脂使用前,将储存瓶轻柔颠倒数次,使琼脂糖珠充分混悬均匀,避免剧烈震荡,防止微球破碎。