20124 成分与 20123 相同,以溶于DMSO 的溶液形式提供。二者均不含EDTA,EDTA 为金属蛋白酶抑制剂。区别在于 20123 为片剂,20124 为储液。
将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B,并加入PMSF至最终浓度为1 mM,混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60 mg组织加入200 µL组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液(对于不超过60mg的组织样品,仅需加入100微升组织匀浆液),并在玻璃匀浆器内充分匀浆。接…
仅适合于新鲜组织,不可用于冻存过的组织样本。
本产品不适用于真菌及植物样品的。
不建议冻存后再提取,需要新鲜样本,不适合冻存。可提取蛋白后再冻存到-80℃。
无色或几乎无色透明粘稠液体。能溶于水、甲苯、二甲苯和乙醇,不溶于石油醚。
气相色谱固定液(最高使用温度 190℃,溶剂为丙酮、氯仿、二氯甲烷、甲醇)分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性含氮化合物、硫醇。
在生物化学实验中,Triton-X114 常用于水相蛋白和脂蛋白的分离,如膜蛋白的提取等。
Triton-114 是常用完整的膜蛋白相分离试剂,利用其浊点特性:升温后,去污剂相与水相分离。疏水的膜蛋白因结合去污剂而随其进入去污剂相,亲水蛋白则留在水相,从而实现分离。该试剂能使亲水性的蛋白质从两亲性的蛋白质中溶解出来,能够对膜外周蛋白和膜整合蛋白进行亚组分分离,更具有灵活性。
具有刺激性,可能造成皮肤、眼睛刺激或呼吸道刺激。操作时务必穿戴实验服、手套和护目镜,在通风橱中进行。
正常的,本品为 100× 高浓度储存液,低温可能会有一些盐类物质析出,可以尝试温育待沉淀完全溶解后再取用,一般不影响使用效果。
可以的,用cocktail替代PMSF,在许多情况下是更优的选择,特别是当你的实验目的是全面保护蛋白样品时。
正常的,冻结不影响有效成分活性。使用前将分装管取出,温育至完全融解可正常取用;避免反复冻融。
磷酸酶抑制剂混合物具有广谱性,本品可用于 WB,Co-IP,Pull-down assay,IF, IHC,激酶研究等多种分析。
AEBSF 是一种水溶性,不可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,广谱抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、纤溶酶、激肽释放酶和凝血酶活性。
AEBSF常用于细胞裂解液和蛋白纯化过程,以防止目标蛋白被降解。使用浓度可达 0.25 mM,推荐使用浓度为 0.1-1 mM。
一般不会。总的来说,优点大于缺点。相对于影响蛋白等电点,AEBSF 可更好地预防蛋白降解,并提高蛋白制剂的纯度。
亮胰酶肽(Leupeptin)可有效抑制纤溶酶、胰蛋白酶、蛋白酶K、激肽释放酶、木瓜蛋白酶、钙蛋白酶和组织蛋白酶 B、H 和 L,但不可抑制胃蛋白酶、组织蛋白酶 D、凝血酶或者α-糜蛋白酶。
透析是最常用且有效的方法,利用亮抑酶肽是小分子的特点,将其从大分子蛋白溶液中分离出去。
强烈不建议。该产品的工作液稳定期较短,所有操作最好在冰上进行。