应用案例基质胶应用(3)-细胞侵袭实验
导 语肿瘤转移是癌症治疗的最大挑战之一,而细胞侵袭实验是研究癌细胞迁移能力的“黄金标准”!如何利用基质胶精准构建体外侵袭模型?实验关键步骤与试剂如何选择?翌圣生物本期技术专栏为您揭晓答案!PART.01细胞侵袭实验细胞侵袭实验通过模拟癌细胞穿透基底膜的过程,评估其迁移与侵袭能力,广泛应用于抗肿瘤药物筛选、转移机制研究及靶向治疗开发。实验中,基质胶(如翌圣生物
导 语肿瘤转移是癌症治疗的最大挑战之一,而细胞侵袭实验是研究癌细胞迁移能力的“黄金标准”!如何利用基质胶精准构建体外侵袭模型?实验关键步骤与试剂如何选择?翌圣生物本期技术专栏为您揭晓答案!PART.01细胞侵袭实验细胞侵袭实验通过模拟癌细胞穿透基底膜的过程,评估其迁移与侵袭能力,广泛应用于抗肿瘤药物筛选、转移机制研究及靶向治疗开发。实验中,基质胶(如翌圣生物
卵巢癌类器官(Ovarian Cancer Organoids,OCOs)是源于卵巢癌组织或肿瘤细胞的三维体外培养模型,通过模拟体内肿瘤微环境(细胞外基质、特异性细胞因子及小分子化合物),让肿瘤细胞在体外自我组装形成具有三维结构、保留原发肿瘤核心生物学特征的“微型肿瘤”。其本质是对体内卵巢癌的“体外复刻”,是连接基础研究与临床转化的核心工具。01卵巢癌类器官
肠道是人体重要的消化器官,肠指的是从胃幽门至肛门的消化管,是消化器官中最长管道,人体肠道结构主要包括小肠和大肠。肠道疾病非常常见,如肠梗阻、慢性炎症性肠病、结直肠癌等,其中结直肠癌已成为威胁人类健康最严重的疾病之一。因此,肠道的研究是现在非常热门的领域,有着广阔的应用前景。01人肠类器官培养步骤人肠类器官的培养重悬隐窝基质胶混合物,孔板中加入一定量的混合物和
宫颈癌类器官是指利用宫颈肿瘤细胞等在体外培养出的3D细胞培养物并具有一定的空间结构组织类似物。宫颈癌类器官可以作为疾病模型,相较于传统2D疾病模型,其在阐明疾病的发展、稳态性和发病机理等与体内环境更加接近,能作为宫颈癌治疗、诊断和发病机制研究的理想试验模型。01宫颈癌类器官培养步骤样本预处理(手术切除样本/宫颈活检样本)新鲜样本处理(黄金时间:离体后1h内)
结肠癌类器官是利用患者自身的结肠癌组织样本,在特定三维培养条件下培育出的微型肿瘤模型。它能高度模拟原始肿瘤的复杂结构、基因特征和药物反应,为科学家研究癌症机制、为医生筛选有效抗癌药物提供了强大的个性化工具。01结肠癌类器官培养步骤结肠癌类器官的分离为去除细胞沉淀中的红细胞,在冰盒中加入2 mL红细胞裂解液(40401ES)裂解5分钟,然后以600 g离心,P
乳腺癌类器官(Breast Cancer Organoids,BCOs)是源于乳腺癌组织或肿瘤细胞的三维体外培养模型,通过模拟体内乳腺肿瘤微环境(细胞外基质、特异性细胞因子及信号分子),让肿瘤细胞在体外自我组装形成具有三维结构、保留原发肿瘤核心生物学特征的“微型肿瘤”,是连接基础研究与临床转化的核心工具,尤其适配乳腺癌的高度异质性特征。01乳腺癌类器官培养步
小鼠气管类器官是从小鼠气管基底干细胞在体外3D基质胶中培养而成的微型器官。它能够自我更新和分化,形成包含基底细胞、纤毛细胞、分泌细胞(如杯状细胞)等多种气管上皮细胞类型的空腔结构,非常适合用于研究呼吸系统发育、疾病建模(如哮喘、慢性阻塞性肺疾病、感染)、药物筛选和再生医学。01小鼠气管类器官培养步骤气管组织分离与单细胞悬液制备消化后的细胞悬液通过70 μm滤
小鼠肾类器官的培养是一个基于发育生物学原理的精细过程,其核心是在体外模拟胚胎肾脏的发育环境,引导肾脏祖细胞自组织形成类似肾单位的结构。01小鼠肾类器官培养步骤第一步:后部中胚层诱导——奠定肾源性分化基础目标:将多能干细胞定向诱导为具有形成肾脏潜能的后部中胚层细胞。01细胞准备使用小鼠ESC或iPSC。将细胞以一定密度接种于基质胶(Ceturegel)(401
小鼠胃类器官的培养核心是“模拟体内胃组织发育微环境+利用胃上皮干细胞的自我更新与定向分化潜能”,通过体外重构关键信号通路、细胞外基质和营养条件,让胃源性干细胞(或组织片段)自发组装形成具有胃组织特异性结构和功能的三维器官样结构,本质是对体内胃上皮再生与稳态维持机制的体外复刻。01小鼠胃类器官培养步骤实验前准备培养基配制:基础培养基选用DMEM/F12(414
小鼠小肠类器官的核心是隐窝干细胞。通过模拟肠道干细胞巢的微环境,实现在体外三维培养中的长期自我更新和分化。01小鼠小肠类器官培养步骤小鼠小肠类器官的原代培养样本制备:小鼠断颈处死,表面喷洒酒精杀菌。在无菌环境下截取出近胃端处3-15 cm肠组织,用镊子小心去除肠道外部的肠系膜、脂肪,放入4℃预冷的含1%双抗(60162ES)的DPBS(60154ES)溶液中
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备获取子宫内膜活检样本,于无菌条件下操作。2.样本清洗使用预冷的PBS缓冲液冲洗活检组织样本,直至冲洗液澄清。样本重量约为1g。3.样本处理将清洗后的子宫内膜组织置于培养皿中,
实验所用产品产品货号40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备获取口腔鳞状细胞癌手术标本,使用生理盐水冲洗表面。在无菌环境下,截取出约1*1*1 cm大小的组织块,用镊子小心去除肉眼可见的坏死组织和主要血管后,放入4℃预冷的含1%双抗的DPBS
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备将8周龄的C57雄性小鼠断颈处死,置于酒精中浸泡5分钟消毒。在无菌操作环境下,截取约8 cm的小肠组织,放入4℃预冷的DPBS溶液中。2.样本清洗使用10 mL DPBS溶液
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备将出生后第2-3天(P2-3)的小鼠断颈处死,体表喷洒酒精消毒。在无菌环境下取出小鼠耳蜗,置于预冷的HBSS缓冲液中。使用精细镊子小心去除附着于耳蜗上的结缔组织与多余组织。2
实验所用产品产品货号40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1. 消化酶配制配制复合消化酶HRA工作液:取4.7 mL无血清基础培养基,依次加入200 μL H液、100 μL R液和30 μL A液,混合均匀。在管身标记名称与日期。2. 样本预处理将肿
实验所用产品产品货号40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1. 样本制备获取卵巢癌手术标本,于无菌条件下操作。使用生理盐水冲洗标本表面。截取约1*1*1 cm的组织块,用镊子小心去除肉眼可见的坏死组织和主要血管后,放入4℃预冷的含1%双抗的DPBS溶液
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1.样本制备获取子宫内膜活检样本,于无菌条件下操作。2.样本清洗使用预冷的PBS缓冲液冲洗活检组织样本,直至冲洗液澄清。样本重量约为1g。3.样本处理将清洗后的子宫内膜组织置于培养皿中,
实验所用产品产品货号产品名称40192ES基质胶 Ceturegel® Matrix,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus(同康宁matrigel胶)1. 样本制备在无菌条件下,通过显微手术摘取小鼠肝脏组织。2. 样本消化将肝脏组织转移至离心管中,加入适量预热的小鼠正常肝原代组织消化液。消化液体积应为组织体积的3-5倍。随后,将离心管
实验所用产品:产品货号产品名称40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶解冻与稀释:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C冰箱过夜完全融化,所有后续操作均在冰上进行。用预冷的无血清培养基按 1:8 比例进行稀释。铺胶:用预冷的枪头垂直吸取 约60 μL 稀释好的
实验所用产品:产品货号40183ESCeturegel基质胶(同matrigel基质胶,BD基质胶,康宁基质胶)一、Transwell小室基底膜制备基质胶解冻与稀释:将Ceturegel®基质胶置于冰上,于4°C完全融化,所有操作在冰上进行。用预冷的无血清培养基按 1:1 比例进行稀释(注:此比例下基质胶终浓度较高,约4.5-5 mg/mL,适用于侵袭能力较