Case Studies血管生成实验案例五:中科院长春应用化学研究所(第5代HUVEC)
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板细胞来源:所用细胞为第5代HUVEC(非原代),购自中科院细胞典藏中心。基质胶解冻与耗材预冷:实验前一天,将基质胶置于4℃冰箱过夜解冻;同时将实验所需的孔板、枪头置于-20℃冰箱预冷。提前开启制冰机,用铁盒装满碎
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板细胞来源:所用细胞为第5代HUVEC(非原代),购自中科院细胞典藏中心。基质胶解冻与耗材预冷:实验前一天,将基质胶置于4℃冰箱过夜解冻;同时将实验所需的孔板、枪头置于-20℃冰箱预冷。提前开启制冰机,用铁盒装满碎
——诱导不对称CRL3–HDAC1/2组装以降解CoREST辅抑制因子
巨噬细胞是参与广泛生理和病理过程的关键先天免疫细胞。使用氯膦酸盐脂质体清除巨噬细胞通常用于研究小鼠体内巨噬细胞的功能。在此,我们描述了一种方案,该方案结合了对常驻巨噬细胞的清除,以及在实验性脓毒症模型背景下,用体外分化、慢病毒转导的骨髓源性巨噬细胞(BMDMs)对小鼠进行重建。该实验策略可灵活应用于其他实验方案。实验方案1. L929条件培养基的准备+L92
实验所用试剂设备清单货号产品名称19292ESMolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物 RNA提取试剂盒—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,RNase-free离心管,β-巯基乙醇、无水乙醇等。2.首次使用前,在1 mL裂解液LB*中加入20 μL β-巯基乙醇。3.首次使用前
实验所用试剂设备清单货号产品名称19301ES50MolPure® Bacterial RNAKit 细菌RNA提取试剂盒10402ES溶菌酶—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,1.5 mL RNase-free 离心管,无水乙醇等。2.首次使用前,在漂洗液W*瓶中加入4倍体积的无水乙醇,充分混匀后使用,并做好标记。如
实验所用试剂设备清单货号产品名称18801ESMolPure® PlantPlusDNAKit 多糖多酚植物DNA提取试剂盒10406ESRNase A19203ESRNA Extraction buffer RNA提取辅助试剂(完美替代氯仿)—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,β-巯基乙醇、无水乙醇、氯
实验所用试剂设备清单货号产品名称18801ESMolPure® PlantPlusDNAKit 多糖多酚植物DNA提取试剂盒10406ESRNase A—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,β-巯基乙醇、无水乙醇、氯仿或氯仿替代物(19203ES),液氮(组织研磨用),1.5 mL离心管等。2.所有的离心步
实验所用试剂设备清单货号产品名称18800ESMolPure® Plant DNAKit 植物DNA提取试剂盒—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,100%乙醇,液氮(组织研磨用),1.5 mL离心管等。2.所有的离心步骤均在室温完成,使用可以达到12,000 rpm转速的传统台式离心机。3.首次使用前,在去蛋白液PL*
实验所用试剂设备清单货号产品名称19292EMolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物 RNA提取试剂盒—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,RNase-free离心管,β-巯基乙醇、无水乙醇等。2.除特殊指明外,所有的离心步骤均在室温完成,切勿冰浴或低温离心。使用可以达到12,0
一、 实验准备:固定液: 含 4% 多聚甲醛的 1× PBS透化液: 100%甲醇,使用前置于 -20℃ 预冷抗体稀释液: 含 0.5% BSA的 1× PBS细胞准备:悬浮细胞: 250g 离心收集细胞。贴壁细胞: 吸去培养基,用 300 µL 1x PBS 快速洗涤细胞两次。然后用胰酶消化细胞,并通过轻柔吹打使其分散为单细胞悬液,最后离心收集。二、 细胞
小鼠海马神经元原代培养是研究神经元发育、轴突与树突形态、突触功能及其他多种神经元特性的重要体外模型。本文详细阐述了从小鼠胚胎海马组织(E17.5/E18.5)制备原代神经元的分步操作流程。本方案涵盖神经元培养体系制备、培养及鉴定的全部关键步骤,采用本方案获得的海马神经元,可根据不同实验目的接种于各类细胞培养皿,且可在一周内获得纯度高、分化成熟、性能稳定的神经
—— 精准调控Wnt/FGF/BMP信号轴定向诱导肾谱系特化与干性维持
—— 精准调控 PKC/RA/TGF-β 信号轴定向诱导胰腺谱系特化与干性维持
实验所用试剂清单货号产品名称19221ESMolPure® Flash Cell/Tissue Total RNA Kit 快速细胞/组织总 RNA 提取试剂盒10604ESRNAsafe Tissue Stabilizer RNAsafe动植物组织RNA稳定液—无水乙醇实验前准备漂洗液 W*(19221-E)瓶中加入标签指定量的无水乙醇冰冻组织保存在RNA
—— 靶向调控ROCK、Wnt/β-catenin信号通路实现角膜缘干细胞体外扩增与干性维持
—— 精准调控 Wnt/FGF/BMP 信号轴定向诱导肝谱系特化与干性维持
—— 靶向炎症信号通路增强造血干细胞归巢与移植潜能一、研究背景造血干细胞(Hematopoietic Stem Cells, HSCs)是造血系统的基石,具有自我更新和分化为所有血液细胞谱系的能力,是骨髓移植和基因治疗的核心细胞来源。然而,临床造血干细胞移植面临供体不足、移植后造血重建延迟等关键问题,其根本原因在于对 HSC 体内稳态调控机制的理解不足,以及
—— 精准调控 SMAD/Wnt 信号轴定向诱导神经谱系特化与干性维持一、研究背景神经干细胞(Neural Stem Cells, NSCs)是一类具有自我更新能力并能够分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的多潜能干细胞,广泛用于神经发育、神经退行性疾病以及再生医学研究。传统神经诱导体系存在效率低、稳定性差、操作复杂等问题,近年来研究表明,通过小分子精准
实验步骤1.细胞准备:将PBMC根据需求加到24孔/48孔/6孔细胞培养板(84013ES/84014ES/84011ES)或培养皿(84002ES)中,细胞密度调整为5×104-2×105/mL2.细胞培养基配制:用RPMI-1640(41402ES)加10%灭活人血清,55 μM β-巯基乙醇(52644ES),100ng/ml IL-2(90213ES
实验步骤一、人单核细胞获取1. PBMC分离①采集外周血于EDTA抗凝采血管中,将血液混匀于无菌50 mL管(83507ES)中,PBS 1:1(41403ES)稀释血液标本②取干净的50 mL管,淋巴细胞分离液(40503ES)、血液、PBS以1:1:1加入,每管15 mL分离液,用10 mL移液管,沿管壁缓缓加入上述血液稀释液至45 mL刻度处,切忌分离