应用案例血管生成实验案例六:重庆医科大学
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶从-20℃或-80℃冰箱取出,转移至4℃冰箱过夜,使其完全解冻。器材预冷与消毒:准备一盒4℃预冷的枪头用于吸取基质胶。实验开始前,将24孔板放置于冰盒中,一同置于紫
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:实验前,将Ceturegel®基质胶从-20℃或-80℃冰箱取出,转移至4℃冰箱过夜,使其完全解冻。器材预冷与消毒:准备一盒4℃预冷的枪头用于吸取基质胶。实验开始前,将24孔板放置于冰盒中,一同置于紫
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板耗材预冷:实验前,将Ceturegel®基质胶、200 μL枪头盒、EP管、24孔板提前放入4℃冰箱解冻/预冷。全程低温操作:所有涉及基质胶的步骤在冰盒上进行。铺板与聚合:在冰盒上,向预冷的24孔板每孔中加入 2
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻:将储存于–20℃或–80℃的基质胶转移至4℃冰箱完全解冻(可过夜放置)。器材预处理:准备4℃预冷枪头用于吸取基质胶。实验前将24孔板置于冰盒中,并进行紫外照射消毒。基质胶稀释:如需稀释,按说明书要求使
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻与耗材预冷:将Ceturegel® 基质胶从-20℃冰箱取出,提前一晚放入4℃冰箱解冻至完全解冻。同时将200 μL枪头放入-20℃预冷。全程低温操作:将完全解冻的基质胶放置在冰盒中,轻轻翻转使其混合均
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻与耗材预冷:提前将Ceturegel® 基质胶从-20℃冰箱取出,放入4℃冰箱过夜融化。将96孔板、无菌移液枪头提前2小时放入-20℃冰箱预冷。全程低温操作:将预冷的96孔板、移液枪头用酒精喷洒消毒后,
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板基质胶解冻与耗材预冷:提前将Ceturegel®基质胶从-20℃冰箱取出,置于冰上,放入4℃冰箱过夜解冻。同时将24孔板、10 μL和200 μL枪头、冰盒等放入-20℃预冷。全程低温操作:所有涉及基质胶的步骤均
实验所用产品产品货号40186ESCeturegel®基质胶(GFR/不含酚红/不含LDEV)(同康宁matrigel胶)一、实验前准备与基质胶铺板细胞来源:所用细胞为第5代HUVEC(非原代),购自中科院细胞典藏中心。基质胶解冻与耗材预冷:实验前一天,将基质胶置于4℃冰箱过夜解冻;同时将实验所需的孔板、枪头置于-20℃冰箱预冷。提前开启制冰机,用铁盒装满碎
——诱导不对称CRL3–HDAC1/2组装以降解CoREST辅抑制因子
巨噬细胞是参与广泛生理和病理过程的关键先天免疫细胞。使用氯膦酸盐脂质体清除巨噬细胞通常用于研究小鼠体内巨噬细胞的功能。在此,我们描述了一种方案,该方案结合了对常驻巨噬细胞的清除,以及在实验性脓毒症模型背景下,用体外分化、慢病毒转导的骨髓源性巨噬细胞(BMDMs)对小鼠进行重建。该实验策略可灵活应用于其他实验方案。实验方案1. L929条件培养基的准备+L92
实验所用试剂设备清单货号产品名称19292ESMolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物 RNA提取试剂盒—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,RNase-free离心管,β-巯基乙醇、无水乙醇等。2.首次使用前,在1 mL裂解液LB*中加入20 μL β-巯基乙醇。3.首次使用前
实验所用试剂设备清单货号产品名称19301ES50MolPure® Bacterial RNAKit 细菌RNA提取试剂盒10402ES溶菌酶—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,1.5 mL RNase-free 离心管,无水乙醇等。2.首次使用前,在漂洗液W*瓶中加入4倍体积的无水乙醇,充分混匀后使用,并做好标记。如
实验所用试剂设备清单货号产品名称18801ESMolPure® PlantPlusDNAKit 多糖多酚植物DNA提取试剂盒10406ESRNase A19203ESRNA Extraction buffer RNA提取辅助试剂(完美替代氯仿)—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,β-巯基乙醇、无水乙醇、氯
实验所用试剂设备清单货号产品名称18801ESMolPure® PlantPlusDNAKit 多糖多酚植物DNA提取试剂盒10406ESRNase A—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,β-巯基乙醇、无水乙醇、氯仿或氯仿替代物(19203ES),液氮(组织研磨用),1.5 mL离心管等。2.所有的离心步
实验所用试剂设备清单货号产品名称18800ESMolPure® Plant DNAKit 植物DNA提取试剂盒—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,100%乙醇,液氮(组织研磨用),1.5 mL离心管等。2.所有的离心步骤均在室温完成,使用可以达到12,000 rpm转速的传统台式离心机。3.首次使用前,在去蛋白液PL*
实验所用试剂设备清单货号产品名称19292EMolPure® Plant Plus RNA Kit 多糖多酚植物 RNA提取试剂盒—β-巯基乙醇—无水乙醇实验前准备1.自备设备和试剂:台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴,RNase-free离心管,β-巯基乙醇、无水乙醇等。2.除特殊指明外,所有的离心步骤均在室温完成,切勿冰浴或低温离心。使用可以达到12,0
实验所用试剂清单试剂名称货号Hieff Trans® LipoBooster 3000 Transfection Reagent Lipo3000转染试剂40801ES细胞培养与传代(T25)润洗:吸弃旧培养基,加入3-4 mL常温PBS轻晃润洗10-20秒后吸弃。消化:加入1 mL胰酶润湿瓶底,37°C孵育消化。吹落:待细胞间隙变大、形态变圆时,直接用胰酶
实验所用转染试剂试剂名称货号Hieff Trans®RNAiBoost Transfection Reagent转染试剂40807ES细胞培养与传代(T25)细胞计数:从培养箱取出细胞,细胞悬液吹打混匀,使用细胞计数仪检测细胞活率及密度。细胞传代(直接稀释法):根据计数结果,将细胞按照5E5 cell/mL左右进行细胞传代。细胞传代(半换液法):若待传代细胞
一、 实验准备:固定液: 含 4% 多聚甲醛的 1× PBS透化液: 100%甲醇,使用前置于 -20℃ 预冷抗体稀释液: 含 0.5% BSA的 1× PBS细胞准备:悬浮细胞: 250g 离心收集细胞。贴壁细胞: 吸去培养基,用 300 µL 1x PBS 快速洗涤细胞两次。然后用胰酶消化细胞,并通过轻柔吹打使其分散为单细胞悬液,最后离心收集。二、 细胞
甘油,化学名为丙三醇(Glycerol / Glycerin),为无色、无臭、透明的黏稠液体,特点是高沸点、高黏度、强吸水性、与水任意比例互溶,在分子生物实验中,常用来做蛋白的低温保护剂、降低 PCR 引物二聚体、提高特异性或作为电泳上样缓冲液成分等。
小鼠海马神经元原代培养是研究神经元发育、轴突与树突形态、突触功能及其他多种神经元特性的重要体外模型。本文详细阐述了从小鼠胚胎海马组织(E17.5/E18.5)制备原代神经元的分步操作流程。本方案涵盖神经元培养体系制备、培养及鉴定的全部关键步骤,采用本方案获得的海马神经元,可根据不同实验目的接种于各类细胞培养皿,且可在一周内获得纯度高、分化成熟、性能稳定的神经