Techniques氧化应激|自由基清除实验全攻略
氧化应激|自由基清除实验全攻略
氧化应激|自由基清除实验全攻略
PCR技术已经成为生物学实验室的常备技能,荧光定量,基因测序等大家耳熟能详的技术也和PCR息息相关。微量的DNA模板在DNA聚合酶、引物的作用下,以dNTP为原料,经过数十次的热循环过程便可实现指数级的增长,耗时大约1-2小时。如此精细配对而又快速的反应,能够拥有一个保真性好的DNA聚合酶显得格外重要。
未经修饰的鬼笔环肽无法穿越细胞膜,这使其难以直接应用于针对活细胞的实验。FITC和Rhodamin等荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-actin结合,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。
T4多聚核苷酸激酶(T4 Polynucleotide Kinase,T4 PNK)作为NGS文库构建的关键酶之一,发挥了至关重要的作用,接下来小翌将围绕T4 PNK的作用方式、应用场景等方面进行介绍。
抗原抗体是化学发光试剂最为核心重要的原料,其质量好坏直接影响试剂的质量。在进行化学发光试剂研发,如何选择抗原抗体,其质量评价指标有哪些,本文带你了解抗原的那些事儿。
如何选择细胞平衡盐缓冲液D-PBS、EBSS、HBSS
聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)是目前工业化、大规模瞬时转染表达重组蛋白或病毒载体领域使用最广泛的基因载体和转染试剂。PEI是阳离子聚合物中的一种,下面我们对阳离子聚合物与PEI转染的原理与使用的操作方法进行一个阐述。
等温核酸扩增技术根据不同的扩增原理可分为很多类,目前最常见、应用最广的当属日本学者Notomi等在2000年开发的环介导核酸等温扩增技术(LAMP)。LAMP的技术特征是针对靶基因上的六个区域设计四条引物,利用链置换型的BST DNA聚合酶在60~65℃恒温条件下进行扩增反应,在15-60 min内实现109-1010倍的扩增。
重组酶聚合酶扩增RPA是一种近年来发展起来的等温扩增技术,具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且检测时间短等优点,特别适用于基层和现场即时检测。
渥曼青霉素(Wortmannin, KY 12420)是从真菌的培养液中分离和纯化的固醇类微生物代谢物,是分离自丝状真菌-绳状青霉(Penicillium funiculosum)的抗真菌类抗生素,具有抗炎活性,没有抗细菌能力,但能特异性地抑制真菌。
去糖基化是将多糖从糖蛋白中去除的过程,从而更好的研究糖蛋白中的多肽部分和多糖部分的结构和功能。
干细胞的治疗潜能越来越受到重视,如何诱导干细胞定向分化是当前研究的热点。研究发现,小分子化合物在干细胞调控中发挥着越来越重要的作用,因此,充分研究并利用小分子化合物,可以为干细胞的研究提供有力的工具,为癌症、心脑血管疾病,神经退行性疾病,糖尿病等疾病的治疗带来新的希望,尤其是骨髓间质干细胞治疗神经系统疾病具有重要的理论研究意义和广阔的应用前景。
近期,《Nature》期刊在线刊登了应用人多能干细胞向胚胎8细胞状态人工诱导的科研成果。在此研究中,研究人员开发了一种非转基因、快速且可控的“鸡尾酒”细胞重编程方法将人多能干细胞诱导成类似受精卵发育3天状态的人类全能干细胞,即8细胞期胚胎样细胞(8细胞样细胞,8-cell embryo-like cell,8CLC),这是迄今为止在体外诱导获得的“最年轻”的
咪喹莫特(imiquimod,IMQ)诱导的小鼠模型应用最为广泛,其不仅较好地模拟了银屑病样的皮损表现,也一定程度地存在与银屑病相似的固有免疫和获得性免疫紊乱。该模型因其操作便利,成功率高,在文献中被大量采用。
6-OHDA是一种去甲肾上腺素同系物,对儿茶酚胺神经元及其末梢具有选择性损毁作用,使黑质的多巴胺(dopamine, DA)合成及向纹状体的输送通路受到破坏,导致儿茶酚胺类递质和乙酰胆碱类递质失衡,从而产生偏侧旋转等一系列类似于人类帕金森病(parkinson disease, PD)症状和病理的特征性变化。
特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一个与遗传相关的慢性复发性皮肤病,表现为过敏性湿疹,所以又叫异位性皮炎、遗传变应性皮炎、遗传过敏性皮炎。
环介导等温扩增(loop mediated isothermal amplification,LAMP)使用具有链置换特性的Bst DNA聚合酶,在等温条件下高效、快速、特异性扩增靶标序列,可在15-60分钟内实现109-1010倍的扩增。
分子克隆包含:目的基因扩增、载体线性化、连接以及转化筛选。说到载体线性化,除了PCR线性化载体,大多数小伙伴会选择酶切进行载体线性化。对于一些单酶切位点的线性化载体,我们常常需要碱性磷酸酶进行载体去磷酸化。
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种慢性非特异性结肠炎性反应,病变主要位于结肠的黏膜层,临床表现为持续或反复发作的腹泻、黏液脓血样便伴腹痛,该病病程长,治愈难度大,且与结肠癌关系密切,属于消化系统难治疾病之一。
体外诊断行业,准确性永远摆在第一位。选取分子POCT产品开发技术路线上,一步法提取会使检测耗材的设计更简单,可制造性更强。如恒温扩增(LAMP,RPA等等)相比于定量qPCR检测来讲,对于温度控制要求低很多,它的仪器开发起来更加简单,恒温扩增速度也能更快。同时定量qPCR检测的检测性能会比恒温扩增更有优势。各厂家可根据自家各平台特点来选择更适合自己的分子PO