Applications让RNA建库,像RT-PCR实验一样操作简单
预混版RNA建库试剂盒给您不一样的操作体验
时代在发展,科学在进步。高通量测序技术已经走进越来越多的课题组,RNA-seq也不再高冷而神秘,已经作为常规的基础实验出现在各大期刊内。但是,是否仍然有人看到RNA-seq就头大、就畏惧,就觉得特别难呢?
预混版RNA建库试剂盒,解决了您的实验问题。试剂组分通过提前预混,精简组分,操作时,再也不用担心试剂漏加;样本多时,再也不用担心预配置试剂少了;实验上,再也不用担心加错组分了!

图:预混版与非预混版的试剂差异
操作步骤 | RNA建库 | RT-PCR |
RNA提取 | 有 | 有 |
gDNA去除 | 无 | 额外加三种试剂(ddH2O、gDNA digester buffer、gDNA digester),PCR一次 |
RNA片段化 | 额外加一种试剂(Frag/Prime Buffer),PCR一次 | 无 |
逆转录 | 额外加一种试剂(1st Reaction Module),PCR一次 | 额外加四种试剂(ddH2O、逆转录酶、逆转录buffer、逆转录引物),PCR一次 |
二链合成 | 额外加一种试剂(2nd Reaction Module),PCR一次 | 无 |
接头连接 | 额外加一种试剂(Ligation Reaction Module),PCR一次 | 无 |
PCR扩增 | 额外加两种试剂(扩增酶、接头引物),PCR一次 | 额外加四种试剂(ddH2O、扩增酶、扩增引物、定量后模板),PCR一次 |
纯化 | 磁珠纯化 | 切胶回收 |
测序 | 二代测序 | 一代测序 |
后续步骤 | 无 | 载体构建等 |
从上面步骤,可以看到,预混版试剂,实验操作不再复杂,加一次试剂,PCR一次,共加5次试剂(每次只加一个组分),PCR程序设置5次,即能获得文库。减少失误,减少失败率,RNA建库就是如此easy。
实验操作简单化,原理不太懂?没关系,实验原理,实验操作,B站关注翌圣生物,各种实验操作、技术原理,一应俱全(翌圣生物的个人空间_哔哩哔哩_bilibili)。
适用样本?不限制,物种全适用,不挑样本,RNA提取后,根据提取的质量好坏,技术类型,选择mRNA建库还是lncRNA建库方式,预混版RNA建库都能兼容。
不相信?来,上数据。

图:不同物种mRNA建库,文库主峰都集中在500 bp左右
2.自动化建库和手动建库都兼容

图:Illumina平台自动化和手动建库结果对比,文库一致,产量相当

图:MGI平台自动化和手动建库结果对比,文库一致,产量相当
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