ApplicationsRNA提取常见问题及解决方案（高频避坑）

常见问题

可能原因

解决方案

RNA降解（电泳呈弥散带，无清晰条带）

a b

轻微降解：28S条带变淡，出现降解带；b严重降解：只剩18S条带或一片模糊

1. 样品室温放置过久，RNase被激活；2. 器材/试剂含RNase；3. 反复冻融样品；4. 操作剧烈，RNA断裂。

1. 样品取样后立即速冻或加入裂解液；2. 更换无RNase器材/试剂，DEPC水配制试剂；3. 样品分装保存，避免反复冻融；4. 温和操作，避免剧烈震荡、吹打。

RNA浓度低（Nanodrop检测浓度<50ng/μL）

1. 样品量过少；2. 裂解不充分；3. 沉淀时RNA丢失；4. 洗涤时RNA被吸走受到损失。

1. 增加样品量，调整样品与裂解液的比例；2. 延长裂解时间、加强研磨/吹打；3. 加入辅助沉淀剂，-20℃过夜；4. 弃上清时小心操作，避免触碰沉淀。

RNA纯度低（Nanodrop检测A260/A280<1.8或>2.0）

1. <1.8：蛋白质污染；2. >2.0：RNA降解或盐离子污染；3. 多糖/多酚污染（植物样品常见）。

1. 蛋白质污染：增加氯仿-异戊醇抽提次数，重新沉淀；2. 盐离子污染：增加75%乙醇洗涤次数；3. 多糖/多酚污染：提取时加入PVPP（聚乙烯聚吡咯烷酮），吸附多糖/多酚。

RNA难以溶解（仅在trizol法中会遇到）

1. 沉淀晾干过度；2. RNA沉淀量过多；3. 溶解时未充分静置。

1. 避免沉淀过度晾干，超净台中风干1-2min即可；2. 减少样品量，重新提取；3. 加入洗脱液后，室温静置10min，温和吹打，必要时37℃孵育5min辅助溶解

DNA污染（PCR检测有DNA条带）

1. 吸取水相时触碰到中层沉淀，造成DNA污染；2. 裂解不充分，DNA未完全分离；3. 样品中DNA含量过高。

1. 重新抽提，小心吸取水相，避免触碰中层；2. 加强裂解，延长室温静置时间；3. RNA溶解后用DNase I处理，去除残留DNA。

系列

兼容样本

主要应用

产品特点

产品名称

产品货号

产品形式

适配提取仪

磁珠法

适用多种动物组织如肝脏、肾脏、脾脏、心脏、皮肤、水产类等样本

转录组分析、基因表达分析

RNA完整性好

磁珠法组织/细胞总RNA提取

18605ES

瓶装

通用

18607ES

板式

80511ES/80512ES

18606ES

板式

80510ES

植物组织

植物转录组分析、基因表达分析

适用于多糖多酚样本提取

磁珠法植物RNA提取

18534ES

瓶装

通用

柱法

各种动植物、细菌组织和细胞样品

转录组分析、基因表达分析

结合了TRIzol法+离心柱，方便快捷

总RNA提取(带离心柱)

19211ES

瓶装

—

细胞、组织

科胶转录组分析、Northern、点杂交、mRNA纯化等分子实验

15min加速提取，RNA完整度好，一次性去除gDNA

细胞/组织总RNA提取

19221ES

瓶装

—

转录组分析、基因表达分析

5min加速提取，RNA完整度好，一次性去除gDNA

培养细胞RNA提取

19231ES

瓶装

—

新鲜血液

血液基因表达分析

TRIzol法，提取得率高

血液RNA提取

19241ES

瓶装

—

植物组织、真菌组织

植物转录组分析、基因表达分析

RNA完整性好

植物RNA提取

19291ES

瓶装

—

多糖多样本提取效率高

多糖多酚植物RNA提取

19292ES

瓶装

—

革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌

细菌表达谱分析

搭配溶菌酶，提取效率高

细菌RNA提取

19301ES

瓶装

—

动物组织、细胞

小RNA分析

TRIzol法，兼容miRNA和total RNA提取

细胞/组织miRNA提取

19331ES

瓶装

—

血浆、血清等液体样本

—

血清/血浆miRNA提取

19332ES

瓶装

—