应用案例MGISP-960在感染、纤维化与慢性气道疾病中的应用：小鼠肺组织转录组mRNA自动化文库构建流程

1、目的：建立适用于小鼠肺组织转录组mRNA的全自动化建库流程

2、平台：MGISP-960（华大智造）

3、样本类型：小鼠肺组织提取的总RNA

4、下游应用：病毒感染、肺纤维化等

5、建库试剂盒：

Hieff NGS mRNA Isolation Master Kit-2.0，货号：12629ES
Hieff NGS^®EvoMax RNA Library Prep Kit（dNTP），货号：12341ES
Hieff NGS^® Stubby UDI Primer Kit for Illumina^®Set1-Set4（板式），货号：12327ES-12330ES
Hieff NGS^®DNA Selection Beads，货号：12601ES

6、文库类型：Illumina

7、自动化耗材和数量：96深孔板12个、PCR板9个、滤芯吸头14盒

8、实验条件：

（1）Input RNA：500ng

（2）片段化时间：94℃-5min

（3）磁珠纯化与分选比例：接头连接产物0.6×纯化，0.65×/0.15×分选，扩增后0.9×纯化

（4）接头添加量：5μM-2.5μl

（5）PCR循环数：14

（6）文库浓度：90.2ng/μl

（7）文库峰图：