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Q:接头中 index/Barcode 组合原则是什么?

接头中 index/Barcode 的组合原则主要包括以下两点:(1)碱基平衡:确保接头序列中 A、T、C、G 四种碱基的含量相对均衡,以避免因碱基组成差异导致的扩增偏差或测序信号异常;(2)荧光平衡:对于带有荧光标记的 index/Barcode,需保证不同 index/Barcode 组合的荧光…

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Q:双端接头,连接过程的注意事项,长接头和短接头有区别吗?

双端接头连接过程的注意事项如下:(1)接头连接时,需确保反应体系中DNA片段、接头及连接酶(如T4 DNA Ligase)的比例合适,且避免过度连接导致的非特异性产物。(2)长接头与短接头的区别主要在于序列组成:长接头(如带完整Index序列的接头)可直接完成文库构建,若样本投入量多(一般需要2μg…

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Q:Set 1 和Set 2 有什么区别?如何选择?

Set 1 和 Set 2 均包含 96 种不同的引物组合,两者合并后可覆盖 384 种引物组合。推荐原则如下:(1)若客户单次上机检测样本数量低于 96 个,可根据实际实验需求选择 Set 1 或 Set 2 中的任意一组进行使用;(2)若客户实验需检测 96 个以上样本,建议同时使用 Set 1…

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