不可以。在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解 5×非变性蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
蛋白免疫产品技术咨询FAQ
本产品不含 SDS 等变性试剂,也不含 DTT、β-巯基乙醇等还原性试剂。
该产品可用于常规的非变性非还原性聚丙烯酰胺(PAGE)蛋白电泳样品上样。
不可以。在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。
按照每 4 μl 蛋白样品加入 1 μl 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液的比例,混合蛋白样品和 5×非变性非还原蛋白上样缓冲液。
请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如沉淀伴随浑浊、异味,发现细菌污染,则应丢弃,避免对实验结果造成影响。
BSA 溶解需要使用试剂盒自带的蛋白标准配制液,后续标准品的稀释可以使用水溶液。
标准品稀释液为蛋白样品的溶解液,原则上,蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用 0.9%的NaCl 或 1×PBS 进行稀释。
可以的,我们公司提供有单独的 BSA 标准品(货号 20204)。
是的,建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,如需精确测定宜每次都做标准曲线。
标准品浓度梯度的配置仅供参考,可以按照需要的浓度梯度进行配置。若按总体积30 μL稀释(1μL 2mg/mL的BSA原液,加29μL的稀释液)无法除尽,终浓度约为66.7 μg/mL 。
该产品灵敏度较20201偏低;易受TritonX-100、SDS 等去污剂的影响;做标曲时,线性较2021差一些。
Bradford蛋白染色液(即A组分)的颜色为淡蓝色溶液。
Bradford 染色液需恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。使用前需颠倒直至充分混匀。
微溶于水,建议先溶于甲醇或者乙醇。
配置后的染色液室温约稳定存放 2-3 周。
考马斯亮蓝 G250 对蛋白胶染色的灵敏度相对较差,最低检测到 0.5 µg 蛋白。但染色背景低,不需要脱色即可进行蛋白条带的观察。因此,非常适合对电泳凝胶蛋白的快速定性分析。
标准品稀释液为蛋白样品的溶解液,原则上蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用 0.9%的 NaCl 或 1×PBS 进行稀释。
不建议重复使用。重复使用后有效染料浓度下降,灵敏度下降,且会污染后续染色背景。
8-10分钟即可完成PAGE胶上蛋白染色,无需脱色。