对于大蛋白>100KD 而言，其在凝胶电泳分离迁移较慢，从凝胶中转出也非常慢， 大蛋白易在凝胶中形成沉淀，从而影响转膜，在转膜时在转膜缓冲液中加入 SDS 至终浓度为 0.1%可以避免这种情况的发生；同时由于甲醇易使 SDS 从蛋白上脱失，因此应降低甲醇的浓度至 10%或者更低。
蛋白免疫产品技术咨询FAQ
本产品配置的电泳液是甘氨酸体系的，可以用于甘氨酸体系的自配胶和hepes体系的预制胶（建议分离30kD以上的蛋白）。加甲醇或乙醇配成转膜液后，适用于所有体系的胶（甘氨酸体系的自配胶、hepes体系和Bis tris的预制胶）。
本品在溶液中带电荷，因此不适用于等电聚焦实验。
本品在磷酸盐缓冲液中，尤其是中性或碱性pH 条件下，不是特别稳定。因此若要在 PBS 缓冲液中使用本品，工作液必须现配现用。
不适合。丽春红染色液可以用于PVDF膜上蛋白的检测。
不建议重复使用。重复使用后有效染料浓度下降，灵敏度下降，且会污染后续染色背景。
染色的蛋白带或蛋白点可进行高效电洗脱，适用于蛋白质谱分析。
可以用热水。但建议优先用少量甲醇溶解。
G250 灵敏度低，检测下限是 0.5 µg，但是检测快，显色清楚，且不需要褪色处理； R250 灵敏度高，检测下限 0.1 µg 蛋白，但是检测相对慢，需要褪色处理。
DTT 粉末的稳定性很高，但是工作液必须现配现用，多余液体需丢弃。
可在蛋白电泳（SDS-PAGE）和 Western blotting 中作为标准参照。
可通过考马斯亮蓝染色、银染或其他蛋白染色方式观察条带。银染相比于考马斯亮蓝染色更灵敏，在使用时应降低Marker 上样量。
变性完的一周内用完，所以建议要用的时候再变性，不可永久使用。
必须完全溶解后再使用。沉淀可能是储存时低温下溶解度下降析出结晶，属正常物理现象，不影响试剂功能，可在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解，
不可以。在室温或不超过 37°C 的水浴中溶解 5×SDS-PAGE 上样缓冲液。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
不会的。5×SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液中 SDS 可与蛋白质结合使蛋白质－SDS 复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被 SDS 掩盖，因此，电泳速度只是与其分子量大小有关。
因为loading里面的染料染料会发生聚集，不同的聚集度会有不同的分子量，所以可能会有分层的现象。
本产品不含 SDS 等变性试剂，但是含有还原性试剂 DTT。
该产品可用于常规的非变性聚丙烯酰胺（PAGE）蛋白电泳样品上样。
按照每 4 μl 蛋白样品加入 1 μl 5×非变性蛋白上样缓冲液的比例，混合蛋白样品和 5×非变性蛋白上样缓冲液。