外泌体纯化柱的孔径为200nm。
这个不属于纯化，是生物试剂 PEG。
细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞融合度约为60%-70%时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基(或者无血清培养基)，继续培养24-48h，细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清，该上清液即可用于提取外泌体。
会的。在收获细胞时，应确定死亡细胞占比不超过5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡，它们在外泌体的提取纯化过程中会污染活细胞产生的外泌体，同时有可能产生大量杂质。
由于某些细胞(如悬浮细胞、干细胞、神经细胞等)中外泌体含量比较低，加了试剂A离心之后肉眼可能无法观察到沉淀，在重悬时使用PBS液朝离心管离心外侧的内壁反复吹打洗脱即可(避免剧烈吹打)。针对提取后的外泌体先进行NTA粒径检测或BCA蛋白定量检测，再决定是否进行后继实验。
可以的，对重新提取的外泌体没有上限要求，等比例添加就好。也推荐超滤管的方式。
沉淀法对染色的外泌体没什么影响。
一般导致这个的原因可能是瓶子没拧紧，不建议再使用了，建议重新购买。
细胞上清液、尿液(可直接提取)、脑脊液(需处理后再提取)。其他的组织液包括体液、唾液、卵泡液、精液等提取效率较低，建议客户用专门的组织液提取试剂盒。
1.全血经过长时间放置，冷冻、离心、会发生溶血现象，无法提取外泌体，必须做好血清血浆的分离。2.去除血清外源的外泌体。
1.将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 10h，去除血清外泌体； 2. 选择无血清培养基进行细胞培养。
细胞融合度达到 60%-70%时，换成新鲜的无外泌体血清培养基(或者无血清培养基)，待细胞融合度达到 80%-95%左右时收取上清即可。
常使用透射电镜检测(形态)、粒径检测(大小)、Western blot 检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行 Western blot 检测时，通常检测外泌体标志蛋白(CD63、CD9、CD81、TSG101 等，优先推荐 CD63 和 TSG101)。
需要，一般按照 1:1 的比例加入 RIPA 试剂，放置在冰上裂解 10-15min，在做 western blot 之前务必做 BCA 蛋白定量。
无，该检测属于定性检测。
该步骤主要用于去除样本或试剂中产生的不溶性杂质沉淀。外泌体实际存在于上清液中，离心产生的沉淀多为蛋白聚集体、脂质团块等不溶性杂质；洗涤后弃除沉淀，保留上清，即可得到纯度更高的外泌体样本。
我们的试剂盒不需要添加1%BSA，是否含1%BSA差距不大。
非无菌。如需无菌，可进行过滤除菌。