单转效率对于验证过的细胞效率都是很好,可以参考FAQ-验证过的细胞系,对于共转由于要涉及到质粒的混合比例和质粒与转染试剂的添加比例问题,因此具体的效率需要做相应的验证。
转染试剂FAQ
不可以冻存,因为转染试剂是一种脂质体阳离子转染试剂,由于脂质体是不能在低温下冻存,因此转染试剂最好是 4 度储存,保持最好的转染效能。
不需要,我们的转染试剂可以在含血清的介质中进行转染的过程。
不需要。脂质体复合物可以稳定存在 6 个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换
这款脂质体转染试剂浓度是10mg/mL。 液,为了保证细胞正常生长所需的营养,需要在 4~6 小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液则在脂质体转染后不需要进行再次换液。
40802产品进行的工艺优化,纯度增高,相应的转染效率也随之变高,建议质粒与转染试剂的比例在1:2进行调整,一旦出现细胞死亡的现象,降低转染试剂比列。或者转染6h后进行换液。
提供不了粒径取决于客户的核酸和实验条件的 不是一个绝对值的。
做悬浮细胞转染的时候,会在前一天进行细胞传代,比如用T25传代,转染当天,根据使用的孔板类型,细胞计数后,吸取对应细胞量加入孔板中,然后补新鲜培养基至一定体积就可以,这个时候就可以直接把转染复合物加进去。
这个不建议转 RNA,建议转染 DNA。
按照40803说明书中建议的体系,先将DNA缓慢加入CacCl2,混合均匀后再缓慢加入到HBS。
聚凝胺稀释不是指用其他溶液稀释,而是指在具体实验中加入的比例,比如实验体系有10mL,按照这个比例(1:1000为例),就直接取10uL的产品(10mg/mL溶液)加入实验体系里面即可。
对于换液可以区分两种情况;1、转染之前如果没有换液应在转染 6 小时左右后换液,以保证细胞生长所需营养,2、如果转染之前如果有换液,可以按照平时等到培养基出现营养不足时换液。
单转效率对于验证过的细胞效率都是很好,可以参考 FAQ-验证过的细胞系,对于共转由于要涉及到质粒的混合比例和质粒与转染试剂的添加比例问题,因此具体的效率需要客户做相应的验证方可。
不可以冻存,因为转染试剂是一种脂质体阳离子转染试剂,由于脂质体是不能在低温下冻存, 因此转染试剂最好是 4 度储存,保持最好的转染效能。
转染进去的 整个细胞是绿色的,可以清晰的看到细胞形态,没有转染进去的就是绿色的杂点儿。
可以换液,转然后8h换液,建议不换液,转染试剂毒性很小,不换液转染效率可以提高。