CCK-8 本身对细胞的毒性非常低,因此 CCK-8 检测完后相同的细胞还能用于其它细胞增殖检测如结晶紫染色法,中性红染色法或 DNA 荧光染色法。
细胞分析FAQ
不会,首先 WST-8 不会进入细胞染色,显色反应是在培养体系中进行的。另外 WST-8 和 WST-8 甲臜都属于高度水溶性组分,反应结束更换新的培养液,即可清除外源组分。因为 CCK-8 是基于 WST-8 能够被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色甲臜产物(Formazan)的原理研制开…
不会的,培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
一般情况下可以不更换培养基。但是如果培养基里有氧化还原性物质的话,有可能会产生误差,必须更换培养基。
太高可以缩短加入CCK-8 后的培养时间。例如:可以把加入CCK-8 试剂后的培养时间由 2 小时缩短为 1 小时。此外,可适当减少细胞的数量。太低可以采取 2 个办法: 1、适当增加细胞数量 2、延长加入CCK-8 试剂后的反应时间。
当培养体系内含有还原性物质存在时会还原 WST-8,从而使 OD 值增加;当有氧化性物质存在时会抑制还原反应进而使 OD 值减小。
①细胞凋亡或者死亡之后乳酸脱氢酶被释放到细胞培养液中,可以长期存在,从而导致检测的OD值偏大。再次说明细胞的活性和OD值并不能完全划等号。建议客户在加入CCK8的时候更换新的培养基,确保得到准确的结果。②加入细胞中的检测药物是还原性的,从而导致OD值偏高。建议加入CCK8的时候更换新的培养基。
可以测一下培养基是否含有氧化还原物质,可能是培养基中的物质引起的。
需要预培养,如果要想保持细胞的最好状态,建议预培养细胞。如果不做细胞预培养 ,细胞内的脱氢酶可能会不稳定。若不做细胞预培养,需在做标准曲线和检测时需要统一检测条件。
可以检测大肠杆菌,但不能检测酵母细胞。向100μl E.coli培养液中加入10μl CCK-8溶液,并培养1-4个小时或过夜。
需要 37℃加热。
可能是灌注时没有灌干净,红细胞留在组织里,另外就是掌握显色时间。
封闭前需要使用2N盐酸处理1h,然后洗去盐酸,再加入等量的0.1M Na2B4O7(四硼酸钠)室温浸泡15min后洗去。目的是:2N盐酸可以使DNA双链变性解开,暴露存在DNA双链中的抗原,即充分暴露BRDU; Na2B4O7 中和盐酸的酸化,若不进行中和会引起后期抗体效价下降,从而导致染色结果不好…
本产品来源于野生型酿脓链球菌S.pyogenes。单导向RNA(sgRNA)骨架可使用5’-NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGUUUUAGAGCUAUGCUGAAAGCAUAGCAAGUUAAAAUAAGGCUAGUCCGUUAUCAACUUGAAAAAGUGGCACCGAGUCGGUG -…
浓度是10 pmol/μL。100pmol是10μL。
带有His标签。
该试剂盒适用的检测样本类型有:细胞、细胞上清液、抗体药(蛋白)、疫苗、病毒液等,对于真菌样本未进行过检测。
可以提取RNA。