不可以,该试剂盒的检测原理是化学发光法。
细胞分析FAQ
需要搭配ATP标准品做标准曲线才可以对被检测样本中的ATP进行定量,否则不能通过检测的发光值直接换算为ATP的浓度。试剂盒本身未配有标准品,需自备。
对于细菌样本不适用。
可以检测ATP的量,但试剂盒本身未配标准品,需自备。
这个试剂加样量和细胞悬液加样量是1比1的,换成大孔板请注意调整试剂加样量,转移不会有影响。
10 mL的试剂对应100T的规格,1T对应100μl的用量。
标曲浓度可以设置0.3nM,0.6nM,1.2nM,2.4nM,4.8nM,9.6nM。
40211和40212两款试剂盒的区别是:①裂解组分不同:40212针对3D细胞进行了优化裂解能力更强,但是具体配方保密。②适用样本类型的不同:40211在100个至20,000个细胞范围内有良好的线性关系,但不同细胞的检测数量上限会有不同。40212适用于细胞团,没有具体的细胞数量范围。
只能进行活细胞的染色。
主要是为了便于观察阳性率,可以根据自己的需求选择。
检测的荧光值表示了样本中capase3/7的活性。
离心去除培养基,收集样本细菌,用 0.85% NaCl 溶液洗涤细胞 3 次(必须充分洗涤以去除培养基,残余的培养基会影响染色效果;不要用 PBS 等磷酸盐缓冲液洗涤,会影响染色效果)。 然后用 0.85% NaCl 溶液制备细胞悬液。
有些显微镜是长通滤片,是可以观察到两种荧光;有的显微镜是带通滤片,不能同时观察到两种荧光的。若客户显微镜为带通道的滤片,建议分开激发和观察。
DMAO是绿色核酸荧光染料,EthD-III是红色核酸荧光染料,不受酯酶的影响。
DMAO为膜透过性核酸染料可染色活细菌的DNA,其结合DNA的原理不能明确;EthD-III不具膜透过性仅可染色死细菌DNA,该染料为DNA插入型染料,具AT碱基偏好性。在实际染色结果中会出现两种情况,且两种结果均为正常结果,原因是一方面染料结合DNA的情况,另一方面因细菌在染色液中的布朗运动:1、…
染色液需要去除;PBS是否清洗对于荧光结果无明显影响。
阳性对照的值比实验组高,需要重新制备。阳性对照是 100%还原型,高温使得阿尔玛蓝变成还原态的。
磷酸根会与Alamar Blue反应。
阿尔玛蓝本身是无菌的。只有制备还原型的时候需要灭菌。不能对浓缩的Alamar Blue高压灭菌。
CCK-8 稳定性高,避光条件-20℃有效期 2 年,4℃有效期 1 年。经常使用建议 4℃ 保存,避免反复冻融。CCK-8 正常颜色为粉红色,若颜色发生明显异常,则可能会影响检测结果。