外泌体拥有膜结构,理论上可被 DiD 探针染色。但本品未开展外泌体染色相关验证实验,暂无配套数据。如需要用于外泌体标记,建议查阅相关文献,并自行开展预实验验证染色效果。
细胞分析FAQ
可以的。染色完成后,如需对细胞样本进行固定,除说明书建议外还可以使用预冷的100%甲醇于-20℃固定15min。
Hoechst33342/PI主要是区分凋亡细胞和坏死细胞的,细胞发生凋亡时,染色质会固缩。Hoechst33342可以穿透细胞膜,染色后凋亡细胞荧光会比正常细胞明显增强。碘化丙啶(PI)不能穿透细胞膜,对于具有完整细胞膜的正常细胞或凋亡细胞不能染色。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性丧失,碘化丙啶(…
Hoechst:1mg/mL, PI浓度:200ug/mL。
Hoechst 33342在37度染色更合适,4度染色可能导致细胞核不能被完全染色。
10 μg/ml
可以的,不用消化,直接染色观察。
钙黄绿素的颜色选择 FL1 通道,PI 的颜色选择FL3 通道。
不建议,对光有影响,效果不好,可以使用玻璃皿。
可判定为死细胞。原因:由于死细胞缺乏酯酶或酯酶活性很低,Calcein AM进入细胞后含有酯酶的活细胞可以产生Calcein,而死细胞不能或很少能产生Calcein,因此仅活细胞会被染色为强绿色荧光,死细胞不能被染色或者染色非常弱。PI由于不能穿透活细胞的细胞膜,而只能染色细胞膜完整性被破坏的死细胞…
染色液 I 和II 保存中出现的少量沉淀是正常现象。染色液 II 可能因为挥发形成比较多的沉淀, 需要过滤沉淀后使用。
颜色深浅可以反应碱性磷酸酶的多少,但是微量差别可能肉眼无法观察,可以进行颜色灰度值测定(此方法可能会存在结果不稳定问题),可参考 WB 条带的计算方法。
根据说明书中是可以的。本试剂盒可用于细胞或组织的碱性磷酸酶显色,包括诱导多功能干细胞iPS 的鉴定,也可以用于结合有碱性磷酸酶的膜的 Western 显色检测等。
不能用于细胞活性检测,本试剂盒主要用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞 iPS 的鉴定,也可以用于 Western 等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测。同时也可以用于细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。 检测细胞活性老师可以用cck-8 等试剂盒。
可以用于24孔板的成骨细胞分化后碱性磷酸酶染色。细胞固定推荐4% PFA室温固定10-15 min(避免甲醇固定,会抑制AP酶活),染色液需现配现用,37°C避光孵育15-30 min后观察。建议同步设置阴性对照(未经诱导的细胞),以区分内源性与诱导后表达的ALP。
BCIP/NBT 染色工作液需现配先用,不能重复使用。
对于DPH的适用溶剂可以是甲醇、丙酮、四氢呋喃THF、氯仿等,不推荐使用DMSO进行溶解。
在石蜡包埋的过程中,温度、固定液等因素可能会导致β-半乳糖苷酶失活,从而造成染色失败,因此本试剂盒不建议用于石蜡切片的衰老检测.
1.样本无衰老情况:如果染色的样本没有诱导成功或衰老程度不明显,从而导致染色的时候着色较浅或者未染上色。 2.试剂未完全溶解:β-半乳糖苷酶染色液解冻后若有沉淀,必须完全溶解无沉淀之后才可以使用。 3.冰冻切片放置过久:冰冻切片时间较长,β-半乳糖苷酶可能降解了。 4.染色时可能把样本放在细胞培养箱…
40755该产品浓度为10 μg/mL,未添加RNase。