PBS中检测到荧光是正常的，因为该产品本身具有荧光。在穿透活细胞膜进入细胞内后转变成不具细胞渗透性的反应产物，该产物能够发出强且明亮的红色荧光。
细胞分析FAQ
该探针本身对于细胞没有偏好性，但不同细胞类型合适的染色工作浓度和时间会有差异。
为减少各种可能的误差，尽量缩短探针装载后到仪器测定所用的时间。
荧光探针类产品对活细胞都会有一定的毒性，因此建议在染色处理完成后应尽快完成检测和观察。
可以尝试增加染色的时间和浓度。
通常使用亲脂性花青染料，如 DiI，DiO，DiD 或 DiR，或者使用活细胞示踪剂如CMFDA等。
可以用于细菌及酵母菌的活性检测，参考文献：PMID: HYPERLINK "https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15362884" \t "https://www.citexs.com/_blank" 15362884（酵母）PMID: HYPERLINK "https:…
该探针本身对于细胞没有偏好性，但不同细胞类型合适的染色工作浓度和时间会有差异。
该探针为活细胞示踪剂，通常可以稳定保留72h。
在合适的工作浓度范围内对细胞通常没有明显的毒性。
可以尝试增加染色的时间和浓度。
通常使用亲脂性花青染料，如 DiI，DiO，DiD 或 DiR，或者使用活细胞示踪剂如CMFDA等。
请参考对于200,000-1000,000个细胞请使用500ul染色工作液。
该DiO染料对细胞膜标记后，可固定不可通透，建议使用活细胞细胞核染料，如Hoechst 33342。
DiI/DiO/DiD 和 DiR 是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散，逐渐使含有膜结构的细胞均被染色。但可以通过缩短染色时间减少染料内化，如缩短为5-10min。
荧光强度：DiO 染色荧光强度通常低于DiR；固定细胞或组织：DiO 染色效果欠佳，DiR 染色效果较好；荧光持续时间：DiR 持续时间较长。有反馈被 DiR 标记的肿瘤细胞在体外培养的条件下可以存活长达 4 周，在体内 15 天后依然有很强的荧光信号。
有如下可能原因：1.DiO 浓度过大，建议适当降低浓度；2.DiO 染色时间过长，建议适当缩短时间；3.使用其它不适当固定液会导致荧光背景较高，建议使用 4%多聚甲醛固定细胞；4.产品购买时间过长，已过期；建议重新购买。另建议先染色再固定。
按照说明书使用DMSO配置1～2 mM储存液时如出现明显不溶沉淀，需使用超声波助溶，条件参考：40kHz，50℃，时间1h左右。由于DiO在DMF中溶解度高于DMSO及乙醇，推荐使用DMF对DiO进行溶解，同样需要使用超声波助溶。
没有。这些染料是亲脂性染料，是通过插入到脂质膜中进而被激光激发观察，染料本身对于细胞没有偏好性。
可以将稀释液加热或超声来进行促溶。