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Q:40704ES通过流式细胞仪可以使用什么指示剂染料来测量钙通量?

Indo-1 是流式细胞术的首选染色剂,使用单一激光器进行激发(通常是氩离子激光器的 351-364 nm 谱线)并监测两种发射,Indo-1 的发射最大值从无 Ca2 +培养基中475nm 转变为当染料被 Ca2+结合饱和时的400nm。另外Fluo-4及Rhod-2等都可以使用流式细胞仪进行检…

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Q:40704ES Fura-2 为什么需要两次不同的激发和发射测定?

结合 Ca2+后的最大激发波长从结合前的 380nm 向 340nm(Ca2+饱和时)偏移,其发射荧光强度与结合 Ca2+的浓度存 在定量关系。一般用 340nm 和 380nm 波长激发 Fura-2,在 510nm 处检测发射波长。通过使用与两种激发对应的荧光强度比 率来计算细胞内的钙离子浓度,…

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Q:40601ES说明书中写的是不加loading buffer,直接点样就可以,点样之后所有样品均没有条带(包含阳性对照),阳性对照加了loading buffeer才有条带。

经确定发现配胶的时候未加入EB染料,染料是加在loading buffer中的,所以不加入自己的loading buffer跑不出条带。EB加入方式:1.如果配琼脂糖凝胶的时候加入EB染料,跑胶的的样品中不需要加入了;2.如果配琼脂糖凝胶的时候未加入EB染料,跑胶的的样品中需要加入EB染料。

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