需要，因为 TdT 酶需要经过通透的细胞才能进入细胞内，而 Annexin V 和 JC-1 是不能进行染色固定的。
细胞产品技术咨询FAQ
不需要，对于贴壁细胞，要先用PBS 洗 2-3 次，然后直接用多聚甲醛固定细胞， 通透处理，染色观察。
4℃放置25 min左右，选择4%多聚甲醛作固定液，乙醇、甲醇、酸性固定液，会导致标记效率低；固定时间不宜过长，过长导致交联程度过高，进而降低标记效率。
在流式中，对于TUNEL检测PI是非必须的，通常可不染PI。
可以，建议如果条件允许最好是使用荧光显微镜或是共聚焦显微镜或流式仪器。
建议染色后应立即进行观察，应当在 30min 内完成整个实验观察过程。
如果试剂盒内提供有稀释 buffer，应使用该溶液配置，如果没有配备，可以使用 HBSS 无血清培养基 PBS 等合适的缓冲液进行配置。
如果是爬片观察，添加的剂量应是尽量浸没细胞为宜，如果采用流式观察使用剂量可以参考说明书建议的用量。
可以，但是需要制备原生质体，因为植物细胞或是细菌（原核生物）含有细胞壁，具体的染液使用剂量只需浸没细胞即可，染色时间对于不同细胞有一定的不同。
需要，因为 TdT 酶需要经过通透的细胞才能进入细胞内，而 Annexin V 和JC-1 是不能进行染色固定的。
不需要，对于贴壁细胞，要先用 PBS 洗 2-3 次，然后直接用多聚甲醛固定细胞，在通透处理，染色观察。
荧光显微镜 共聚焦显微镜 流式细胞仪 酶标仪均可以检测tunel 荧光信号。
荧光基团长期暴露在普通光照下，会发生严重淬灭现象，因此在实验操作上应尽量避光操作和孵育。
使用乙醇或甲醇固定会导致标记的效率较低。酸性固定液，也容易导致假阳性的出现。建议采用新鲜配置的 4%中性多聚甲醛固定液。
保质期是一年，请按照说明书正确存放，并在试剂盒标签上的EXP日期之前使用。
对于荧光较弱的情况可以适当的增加孵育时间和工作液浓度，对于细胞也尽量选择状态较好的细胞进行染色观察。
可能是使用浓度过高造成，可以再适当降低一些试剂浓度；可以在寻找视野时使用低能量的激光，待找到合适视野时使用高能量激光激发观察。
可以，但是需要制备原生质体，因为植物细胞或是细菌（原核生物）含有细胞壁，具体的染液使用剂量只需浸没细胞即可，染色时间对于不同细胞有一定的不同。
试剂盒中PI的浓度是20 μg/ml。
活细胞（Annexin V-/PI-）早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）晚期凋亡细胞和坏死细胞呈现双阳性（Annexin V+/PI+）裸核（Annexin V-/PI+）