不需要。我们的试剂盒这一步无需添加含 1% BSA 的 PBS,是否含 1% BSA 对本试剂盒染色结果影响不大,按说明书操作即可。
可以的,对重新提取的外泌体没有上限要求,等比例添加就好。也推荐超滤管的方式。
41206是旧版,41216是新版。新版多加了除杂蛋白的试剂solution P2,除杂蛋白的效果会好很多。结果上来说,同样的样品新版提取的蛋白浓度会低一些,但是纯度会高一些。老客户一直在用41206就继续推荐41206,新客户推荐41216。两款试剂盒都是共沉淀法,做蛋白质组学推荐41216新款试…
每毫升尿液提取的外泌体蛋白量约10 μg。
0.45um的孔径
该培养基不含青链霉素(双抗),用户可根据实验需要自行添加。建议在使用前补加终浓度为100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素。若用于严格的筛选培养,需确认目标细胞对所加抗生素的敏感性。
41206是旧版,41216是新版。新版多加了除杂蛋白的试剂solution P2,除杂蛋白的效果会好很多。结果上来说,同样的样品新版提取的蛋白浓度会低一些,但是纯度会高一些。老客户一直在用41206就继续推荐41206,新客户推荐41216。两款试剂盒都是共沉淀法,做蛋白质组学推荐41216新款试…
本品滤膜材料与市面上常规超滤管基本一致,无本质区别;该产品为非无菌耗材。
本产品主要适配多数肿瘤细胞收集外泌体,暂未开展内皮细胞的相关验证,无相关实验数据。若需用于内皮细胞,建议先采购小规格培养基进行预实验评估可行性。
不可以重复使用,本产品为一次性耗材。外泌体纯化柱的树脂基质在接触样品后会发生不可逆的结合或堵塞,重复使用会导致交叉污染和纯化效率显著下降。建议单次使用后即丢弃,以保证实验结果的稳定性和可重复性。
推荐上样体积为 200 μL。实际可处理体积也受样品性质影响,上样量过大容易造成柱体堵塞,建议不要超量加载样本。
一般是≥1*109 Particles/mL,最终准确颗粒数以COA 报告标注数据为准。
这个纯化柱是未加填料的。
外泌体纯化柱的孔径为200nm。
这个不属于纯化,是生物试剂 PEG。
细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后,细胞融合度约为60%-70%时,移去原有含血清的培养基,换成新鲜的无外泌体血清培养基(或者无血清培养基),继续培养24-48h,细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。
会的。在收获细胞时,应确定死亡细胞占比不超过5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡,它们在外泌体的提取纯化过程中会污染活细胞产生的外泌体,同时有可能产生大量杂质。
由于某些细胞(如悬浮细胞、干细胞、神经细胞等)中外泌体含量比较低,加了试剂A离心之后肉眼可能无法观察到沉淀,在重悬时使用PBS液朝离心管离心外侧的内壁反复吹打洗脱即可(避免剧烈吹打)。针对提取后的外泌体先进行NTA粒径检测或BCA蛋白定量检测,再决定是否进行后继实验。
可以的,对重新提取的外泌体没有上限要求,等比例添加就好。也推荐超滤管的方式。
沉淀法对染色的外泌体没什么影响。