核酸提取与纯化FAQ

样本量太高，建议初始材料不要过量，后续多漂洗几次。

可能是提取产量低、DNA 出现降解或者纯度低。DNA 提取实验包括样本预处理及 DNA 提取两个环节，涉及到提取材料的新鲜程度、样本裂解-核酸的释放方式、柱结合能力等多个关键点。

DNA的大小分布变化范围很大，主要取决于原始样本DNA的质量。一般固定时间越长，DNA损伤断裂越严重，片段越短。Q：

没有配置 carrier RNA。

可以用于细胞样本DNA提取。处理方法为：培养成熟的动物细胞：1,000rpm离心3min，收集细胞。建议单次提取细胞量不超过5×106个培养细胞。如果细胞量较少，可以提高转速到13000rpm，之后收集细胞沉淀按说明书操作，加入相应裂解液。

可以，需要客户去除坚硬的外壳后再进行 DNA 的提取。

样本过多或没有充分裂解；洗脱不充分。

不建议用于冰冻组织，若需要保护冰冻组织内 RNA 的完整性，可使用我司的 RNAsafe-ICE冰冻动植物组织RNA稳定-过渡溶液（货号：10605ES60），即可将冰冻组织恢复为匀浆用的组织状态，并进行后续的RNA提取，也可以置于-20℃长期保存，维持RNA的稳定性。

在37℃下可稳定1天, 25℃下1周, 4℃下1个月, -20℃或-80℃下可以长期保存。

需要在4℃充分浸润后冻存保存，可以过夜浸润。

19201是浓缩形式，需要的试剂用量更少一点，提取的准确性和提取反应的速度更快一些。一般10606就可以满足常规提取需求，如果客户需求更好的提取效果和rnase抑制效果可以用19201。

这并不意味着裂解不完全。此时，细胞膜实际已完全裂开，并释放RNA，继续后续实验即可。

可根据具体批次的孔尼茨单位（Kunitz Units）计算。如15KU规格的DNaseⅠ，质量约为7.5mg，计算方法为（15KU÷孔尼茨单位)=(15000 Kunitz Units÷≥2000Kunitz Units/mg protein)=7.5mg。

最好快速用完，或者现配现用。-20℃保存。

常用于清除蛋白中的DNA，或者用于向DNA 中引入缺口使标记碱基插入DNA。

10607 以含氯化钙的冻干粉形式供应；10608 以粉末形式供应。两者用途一样，用于清除蛋白中的 DNA。

Kunitz Units和U是不同的单位，不能直接换算，它的酶活就是Kunitz Units不是U，是孔尼茨单位，不能换算的。如果是要要加入150U是没法计算的，但如果是要150 Kunitz Units，可以根据每个批次的COA上的测试的酶活情况计算。比如，某批次酶活是2500Kunitz Uni…

不建议，用水溶解会导致试剂不稳定，而且水中缺少相应的离子激活，影响酶的反应效果。

建议用无 RNA 酶的水稀释。

清除气溶胶污染可以使用翌圣专门的产品DNA/RNA Remover 核酸气溶胶污染清除剂，货号19702ES。