可以，体系可按比例等比缩减，引物、模板、水等其余组分等比例补足。通常缩减到20-25 μL，10 μL要注意避免蒸发，且体系越小加样误差越大。
PCR系列FAQ
都可以的，选哪个主要看操作习惯——PCR后要直接跑胶验证就选With Dye（省一步加样），否则选No Dye，两者送测序都没问题。
PCR体系中的杂质可能会抑制酶切反应，出于实验的稳定性和可靠性考虑，建议在酶切前对PCR产物进行纯化。
普通PCR Mix中核心成分为Taq DNA Polymerase，不具备3'→5'外切酶活性。产物会在3'端多加一个腺嘌呤（A），形成3'-dA突出端。这个 3'-dA突出端 正是TA克隆技术的核心原理。带有这种末端的PCR产物，可以被直接连接到同样带有T突出端的T载体上，而无需进行额外的酶切或平…
目前只有单酶，没有 Mix。
这个做 20 重以上没有问题。
可以不冻干，直接液体使用是可行的。
85℃灭活 5分钟结束后再拿出来观察。
几款的浓度不同，14405是无含油的可以用于做冻干粉的，适用于低浓度模板。
不适用。Taqman探针需要在Taq DNA聚合酶的5’到3’外切活性下发挥功能1. 电泳检测：在RPA的基础上，用凝胶电泳的技术进行终产物检测；探针法检测：1）EXO探针法【RPA+核酸外切酶III（exonuclease III、即exo）+exo荧光探针】2）Fpg探针法【RPA+甲酰胺嘧啶-…
测试的同一区域移液高拷贝（10^6 copies/μl或更高）的模板，则可能会发生污染；样本制备区/试剂准备区/加样区/反应区等尽可能做到分区；每次试验前后或者步骤之间对空气和工作区以及移液器，要用核酸清除剂或10%漂白剂消毒清除气溶胶污染。
保真度和 常规Taq酶基本一致，无保真性。热启动的可以避免非特异性扩增。灵敏度上暂无相关数据。
这款试剂是 No dye，后续产物跑胶时候需要加loading buffer 的。
是热启动配体修是的野生型Taq 酶，货号是10735ES.
1mL预混液中酶活为50 U。
对于全血或者细胞样本，可以不裂解，直接扩增，建议延长预变性时间到3分钟。
不需要的，蓝色的Loading已经预混进PCR Mix中。
a）原理是具有 3’-5’的核酸外切酶活性，即有校正功能。b）Taq 酶错配率：2*10-4，0.0002，大约5kb 有一个碱基发生突变。Canace 约0.00039%，是 taq 酶的 52 倍。c）高保真酶是突变概率低，但不是绝对的不突变。
仅供参考：先对平末端PCR 产物纯化后，浓度要求至少 20ng/ ul（跑胶图像条带清晰，明亮即可），取 14.5 ul PCR 产物，加入 2 ul Taq Buffer，3ul dNTP，0.5 ul Taq酶，在 72℃反应 10~20min, 后直接回收纯化加A 尾的DNA 片段。
原因 1：模板突变。 1.原始模板序列有突变。原因：原始模板序列有突变会使扩增产物的突变位点恒定，表现在多个克隆测序发生突变，且突变位置恒定。判断方法：将模板与 T 载体连接产生的克隆送测序，测序结果与模板序列对比，发生突变且位置恒定，可认为是模板序列发生突变。优化方法：更换序列正确的模板。2.保存…