粘稠属于正常阳性现象：UniPhi29 强持续合成活性产生数十 kb 级高分子量分支 DNA，分子量越大粘稠度越高。标准化处理方案：稀释操作：电泳、Qubit 定量、磁珠纯化前用无核酸酶水稀释 2–10 倍，显著降低粘稠度；电泳验证处理：RCA 产物使用对应限制性内切酶单一位点切割，打散长串联多联体…
UniPhi29 完整保留 3'→5' 外切核酸酶校对活性，该酶活会无差别降解无保护的引物 3' 游离羟基末端。硫代修饰原理：将引物 3' 末端 1–2 个核苷酸磷酸二酯键氧原子替换为硫原子，抵御外切酶切割，稳定引物模板结合。随机六聚体引物、特异性线性引物、锁式探针配套引物的3'末端必须设计至少两个…
10298ES、10299ES（T4 DNA Ligase）可以用于分子克隆。使用时需将酶稀释至常规T4 DNA连接酶用于克隆的浓度，可直接用产品自带的buffer进行稀释，然后按照产品说明书的操作流程执行。
镁离子的问题，冻存偶尔会出现这种的，可在室温震荡溶解，或在不超过30℃环境下温热一会即可。
产生5’磷酸和3’磷酸的缺口Gap。作用机制是UDG 先切除 dU 碱基，形成一个 AP 位点（脱碱基位点），但此时磷酸二酯骨架仍保持完整，Endonuclease VIII 随即在 AP 位点通过 β,δ-消除反应 切断该位点 3' 端和 5' 端 的磷酸二酯键，将无碱基的脱氧核糖彻底释放，留下一…
sgRNA通过其5'端约20个核苷酸的引导序列，与基因组DNA上的特定靶标序列通过碱基互补配对原则结合，从而将Cas9蛋白精确地“引导”到目标DNA位置进行切割。
试剂盒提供的是基于 T7RNA 聚合酶的转录反应体系，含有能被 Cas9 蛋白识别并起支架作用的特异性序列，该序列的一部分能与使用者设计的目标特异序列部分重叠，退火形成互补链后由DNA 聚合酶进行填充生成用于转录的 dsDNA 模板，使用者需要自己设计的特异性 DNA 序列。
小牛肠碱性磷酸酶（CIAP）和虾碱性磷酸酶（SAP）都可以去除载体或片段的5’-末端磷酸基团，但失活方法不同。小牛肠碱性磷酸酶，在底物浓度高时，CIAP的最适pH约为10；底物浓度低时，最适pH约为8，但特异性比高底物浓度时低。同时，其在保存条件下极其稳定，但在螯合剂存在条件下，经65℃、30分钟加…
小牛肠碱性磷酸酶（CIAP）和虾碱性磷酸酶（SAP）都可以去除载体或片段的5’-末端磷酸基团，但失活方法不同。小牛肠碱性磷酸酶，在底物浓度高时，CIAP的最适pH约为10；底物浓度低时，最适pH约为8，但特异性比高底物浓度时低。同时，其在保存条件下极其稳定，但在螯合剂存在条件下，经65℃、30分钟加…
单卖，货号是10684ES。
是转染细胞就可表达荧光的，转染浓度没有标准浓度，常规在1-5 μg/mL之间，一般是转染悬浮细胞用量少一些，贴壁细胞多一些，是游离的mRNA,没有包封。
LNP包封好的
不提供相关服务。新冠疫苗目前主要可以直接参考的还是外网开源的BioNtech和Moderna的疫苗序列。主要原件序列基本是可靠的，除了polyA尾不全；国内比较早的新冠疫苗，还是基于RBD蛋白序列的比较多。这块我们没有要到具体的序列，基本都是各个研发团队的核心技术了。
加帽用的是安捷伦系列（6230B TOF），加尾用的Thermo的QE或waters的Rda。
我们这个试剂盒没有加poly A尾的组分，可以在模板制备阶段将A尾构建到质粒上，长度一般在20-200。
建议13000rcf以上均可满足要求。
沉淀是亚精胺，容易析出，属于正常现象，可以手握加速溶解。
我们的T7酶测试了相对保真度，与Thermo的保真度差不多，大概万分之四的突变率。目前野生型的T7保真度都差不多，基本能满足客户的需求。现项目中没有更高保真度T7的开发计划。
是通过LiCl纯化后进行测定的，我们有记录过相关数据A260/280大概比值再在2.0-2.1之间；使用我们的羧基磁珠纯化也基本在这个范围以内。具体数据可以整理之后再分享。
这一情况是T7反应体系的自身特性，无法完全避免。根据相关的文献，控制mRNA自延长的思路主要还是两方面：①对模板3'末端上游序列进行优化；②控制IVT产量，高产量下自我延伸的几率会更高