综合的,两个蛋白都可以激活,不分亚型。
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不能特异性区分某种亚型。
没有菌液提供。不建议直接用,可以转化到感受态细胞如 DH5α中摇菌抽提质粒进行扩大量。
液体,浓度在 100ng/μl 左右。
阴性对照是 Luciferase Reporter Plasmid negative control (荧光素酶报告基因质粒阴性对照),11555ES03。阳性对照需客户自己参考相关文献。
可以与海肾质粒共转染,有海肾质粒卖,常卖 pGMLR-TK Luciferase Reporter Plasmid(pGMLR-TK 海肾荧光素酶报告基因质粒),11557ES03。
氨苄抗性。
参考文献PMID:14519204。
Elk1/SRF结合的DNA序列通常称为Serum Response Element (SRE)。它与Sterol Regulatory Element(胆固醇调节元件)不同。Serum Response Element (SRE)是SRF结合的DNA序列,通常位于某些基因的启动子区域,参与调控与细…
首先需要确认检测试剂盒的检测性能,另外确认质粒测序的正确性,以及本身信号通路的激活
首先需要确认检测试剂盒的检测性能,另外确认质粒测序的正确性,以及本身信号通路的激活
可保存在-80℃,与蛋白的保存方法类似。裂解后的样本可在-80 ℃保存半年,-20 ℃保存一个月。
这两个底物操作过程中不需要严格避光。保存的时候避光保存,更重要的保存条件是低温,尤其是海肾检测试剂的底物腔肠素,推荐-80℃保存。
比例根据具体实验情况进行调整。建议做预实验:如海参载体与萤火虫载体比例分别用 1:10、1:20、1:50、1:100。
同一个孔里检测。不会相互影响,海肾荧光素酶底物中有淬灭萤火虫荧光值的物质。可以分开检测,但通常是在一个孔里进行检测。
不同检测仪器的灵敏度和参数设置不同,会出现相同样本的本底值检测有差异的情况。
白色不透明的酶标板。
10ml PBS里加入0.3ml Triton X-100,配置成3% Triton X-100。
可对细胞裂解样本进行5倍稀释后再检测。
1、荧光素酶是表达在细胞内,是一种不存在于人类物种的水解酶(所以本底很低),它不能透膜。荧光素酶的底物是环状小分子,是疏水的,因而可以透膜的,因此只要存在荧光素酶表达,那必然是外源的,那么将底物加到细胞培养基中或打到体内均能得到信号。2、报告基因体外检测需要细胞裂解是为了避免细胞转染异质性、底物渗透…