TSS(转录起始位点)富集效果不佳通常可能由以下原因导致:(1)实验样本细胞活性不佳,或细胞核完整性受损(如存在较多游离DNA建议对细胞或细胞核进行镜检,确认其完整性。(2)可尝试优化实验条件,例如调整裂解液成分、控制酶反应温度与时间等,以减少游离DNA干扰并提升TSS富集效率。
可以使用Cat#12221ES试剂盒进行合成的ssDNA建库,该试剂盒包含T4 DNA Ligase(可提供5’端磷酸基团),即使合成的ssDNA 5’端未预先磷酸化,也可通过试剂盒内的磷酸化试剂补充必要的磷酸基团以完成建库反应。
评估BS转化或酶法转化的回收率可采用以下方法:(1)转化前对双链核酸进行定量,转化后对单链核酸进行定量,通过对比两者的量计算回收率;(2)转化前将核酸变性为单链,分别对转化前和转化后进行单链定量,再通过单链量的变化计算回收率;(3)采用qPCR 的方法,通过比较转化前后目标核酸的Ct值差异,计算转化…
在转化过程中,本产品(如Canace系列试剂)会对DNA片段造成损伤或断裂,这种断裂是随机的,无固定片段大小。
转化完成后,产物可在4℃保存,建议保存时间不超过20小时。若需延长保存时间,建议转移至-20℃或-80℃环境以维持转化产物的活性与稳定性,避免影响后续实验结果。
转化效率低可能由以下原因导致:(1)转化试剂混合液(Conversion Reagent Mix)不足或失效:请检查试剂是否按说明书正确配置,以及是否在有效期内;若为冻存状态,使用前需涡旋混匀。(2)反应温度或时间设置有误:请确认转化程序的温度、时间等参数设置是否符合产品说明书要求。(3)DNA样本…
本产品兼容100-100000个细胞或细胞核,最佳投入量为50,000个细胞或细胞核。
在使用本产品对哺乳动物细胞进行染色时,可选择以下缓冲液作为稀释液:(1)无血清细胞培养基;(2)PBS缓冲液。
12640ES与12642ES的区别主要在于产品形态和使用方式:(1)12642ES为预混液形式,属于即用型试剂,可直接加入样品中进行浓度测定,无需额外配制染料工作液,操作更简便高效。(2)12640ES的具体产品特性请参考其对应技术文档或咨询本公司技术支持,以获取更详细的使用说明和差异对比。
染料对RNA的结合能力较弱,但仍可能对定量结果产生一定影响。因此,本公司相关定量产品在有RNA存在的情况下,不建议用于ssDNA的定量,否则可能导致ssDNA浓度检测结果出现轻微偏高。
本产品使用的染料并非特异性结合单链DNA(ssDNA),也会与双链DNA(dsDNA)结合。若样本中存在dsDNA污染,可能会对定量结果产生显著影响。若怀疑样本中存在dsDNA污染,建议使用本公司的双链DNA定量试剂(如相关货号的产品)进行定量排查,以确保结果的准确性。
标准品的荧光值无固定数值,且不同检测仪器、检测条件(如检测体系、试剂版本等)均可能导致结果存在差异。若需验证标准品荧光值的合理性,可通过以下方式:(1)设置多个复孔进行重复实验,观察结果的重复性;(2)采用梯度稀释标准品,检测不同浓度下的荧光信号,验证其是否呈现良好的线性关系。若线性关系良好,通常可…
12640ES与12642ES的主要区别如下:(1)12640ES为染料与缓冲液分开包装的产品,使用前需按说明书要求配制工作液,再加入样品进行浓度测定;(2)12642ES为预混液形式,可直接加入样品即可完成浓度测定,无需额外配制染料工作液。
该现象属于正常现象。12640ES 包含以下组分,其中 A 组分为荧光染料母液,含有 DMSO,。DMSO 低温时易凝固,导致 A 管外观上类似被冻住,但这并非常规意义上的结冰。因此,不会影响其中荧光染料的性能。
本产品不包含DNA标准品,仅含有染料。本公司暂不单独售卖标准品;若需标准品,可购买货号12640ES的产品,该产品包含标准品、TE Buffer和染料。
本产品暂不建议直接用于定量检测血清、培养基和细胞上清等样品中的双链DNA。原因是此类样品中通常含有较多的蛋白质、盐类、代谢物等污染物,可能会对检测体系造成干扰,影响定量结果的准确性。若需检测此类样品中的双链DNA,建议先对样品进行适当的纯化或预处理,以去除潜在干扰物质后再进行检测。
本产品12641ES主要用于双链DNA(dsDNA)的定量分析。关于使用该产品对组织或细胞进行dsDNA染色并直接通过显微镜观察荧光的实验,建议客户参考相关文献或进行预实验以验证适用性,本公司暂未提供此方面的具体实验数据。
本产品目前暂不建议用于细胞dsDNA定量。若客户需对活细胞DNA进行染色,推荐使用Hoechst 33342(货号:40731ES)。
本产品目前的定位是dsDNA溶液的定量,暂未获取用于共聚焦方面的相关数据。若需其他方向的应用,建议参考相关文献以获取更多信息。