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本公司建库试剂盒通常不包含接头，接头产品单独设置货号。客户可根据实验平台（如Illumina、MGI等）及样本数量等需求，选择适配的接头产品。

12199ES 与 12201ES 建库试剂盒的核心区别在于扩增模块的设计。具体选择建议如下：（1）若需高产量扩增，推荐使用 12199ES 建库试剂盒，其扩增模块适配高效扩增需求，可提升样本中目标核酸的产量；（2）如后续实验对扩增保真度要求较高（例如进行单核苷酸多态性（SNP）检测等精准分析），则…

磁珠用量参考如下表（具体用量需根据实际建库体系体积及样本类型调整）：（1）12199（Canace 血液基因组 DNA 建库试剂盒）：建议磁珠用量为体系体积的 1.8 倍（例如 100 μL 体系需 180 μL 磁珠）；（2）12200（Canace 唾液基因组 DNA 建库试剂盒）：建议磁珠用量…

末端修复/加 A 步骤需开启热盖的原因如下：（1）末端修复反应体系中，部分酶促反应（如 Taq 酶介导的延伸反应）在 72℃ 高温下进行，若热盖关闭，反应过程中产生的冷凝液会回流至反应管内，导致反应体系体积损失或局部浓度变化，影响酶活性及反应效率；（2）接头连接反应通常在较低温度（如 16℃ 左右）…

针对FFPE样本建库，建议如下：（1）对于低质量FFPE样本，可使用石蜡样本修复试剂（Cat#12606）以优化文库质量。该试剂能在末端修复步骤中同步完成样本修复，无需额外实验操作，有助于提升文库产量。（2）操作时需注意严格按照产品说明书进行样本预处理及建库流程，确保实验条件（如温度、时间等）符合要…

1）末端修复/加 A：需使用 T4 DNA 聚合酶和耐高温 Taq 酶；2）T4 多聚核苷酸激酶（T4 PNK）；3）接头连接：需使用 T4 DNA 连接酶；4）扩增模块：12201ES 对应的扩增模块为 12621/12624 高保真 DNA 聚合酶；12199ES 对应的扩增模块为 12620E…

接头连接后**不可以直接进行分选**。原因是连接反应体系中含有的Ligation Enhancer（连接增强剂）内含高浓度PEG（聚乙二醇），PEG会对后续的分选过程造成显著干扰。因此，接头连接后若需进行片段分选，必须先通过纯化步骤（如使用磁珠法、柱纯化或乙醇沉淀等方法）去除Ligation Enh…

FFPE样本修复试剂可针对石蜡样本的切口、缺刻及末端氧化情况进行有效修复。对文库构建的影响主要体现在：（1）可提升文库产量；（2）对测序质量（如Coverage等指标）无明显影响。需注意，该修复试剂的修复过程存在额外引入突变的可能性，因此肿瘤等样本的客户不建议使用。

文库片段大小分布通常受二代测序技术的读长限制、测序需求、仪器型号及测序模式（单端或双端测序）等因素影响，一般在 200-800 bp 范围内。

包含mRNA capture beads。但不包含DNA 纯化磁珠。

使用13488试剂盒合成双链cDNA后，若搭配本公司的Cat#12316ES建库试剂盒，可直接进行酶切反应构建文库，无需磁珠纯化；若搭配其他品牌建库试剂盒，建议先使用磁珠纯化双链cDNA后再进行后续建库操作。

1. RNA投入量：本产品适用于Total RNA 500 pg - 1 μg的投入量。2. 投入的RNA类型：可投入总RNA（Total RNA）。3. 引物替换建议：不建议将随机引物替换为oligo dT引物，可能会导致产量降低。若需使用oligo dT引物，需先分离mRNA后再进行逆转录反应。

可以。13488包含逆转录反应和cDNA第二链合成步骤，适用于后续的多重扩增子建库流程。

不可以。12603ES试剂盒的设计用途为从总RNA中分离mRNA，若直接使用其从组织裂解液中分离mRNA，裂解液中的组分及杂质可能会对mRNA的分离效果产生干扰。建议先按照标准流程对组织裂解液进行预处理（如去除基因组DNA、沉淀蛋白等），或选择适用于直接从裂解液中分离RNA的试剂盒。

mRNA占总RNA的比例通常为1%~5%（具体比例因样本类型而异）。若mRNA得率偏低，建议优先检查RNA是否发生降解。操作前，需使用RNase清除剂对实验台面进行清洁；操作过程中，应全程使用无酶耗材，并勤换手套，以避免RNase 污染。

12500ES 试剂盒得到的 cDNA 保存条件如下：（1）一链/二链合成后，可在-20℃保存≤48 h；（2）若进行 mRNA 94℃片段化处理，需在片段化后立即将体系降温至 4℃（或使用冰浴），以避免 Frag/Primer Buffer 在较高温度下持续作用影响片段化效果。

本产品（货号12500ES）适用于以下样本：（1）起始模板量为0.1-4 μg（体积≤50 μL）的高质量真核生物总RNA，包括动物、植物和真菌等来源的总RNA。

12500ES 适用于两种 RNA 建库场景：（1）mRNA 建库；（2）去除核糖体 RNA（rRNA）的建库。

使用核糖体去除试剂盒时，主峰附近出现的小峰可能是建库探针残留。建议通过调整分选比例（如增加或减少分选循环次数）来优化分离效果，以降低此类残留峰的影响。

针对12257产品去除rRNA过程中可能出现的残留问题，建议从以下两方面排查和优化：（1）RNase H Buffer与RNase H酶混合液的稳定性较差，建议在RNase H消化步骤中单独添加酶或现配现用混合液（配置完成后10分钟内使用完毕）；（2）若混匀不彻底可能导致rRNA残留，建议使用振荡器…