制作标准曲线时,需根据具体检测仪器的要求进行操作:(1)若使用Qubit定量法,按照Qubit操作步骤,仅需两个标准品即可完成标准曲线的制作。(2)若使用酶标仪等其他仪器进行检测,为确保标准曲线的准确性和线性范围,需对其中一个标准品(即standard 2)进行多梯度稀释,可使用1×TE缓冲液对其进…
使用荧光酶标仪时,酶标板的选择需结合仪器的光学检测模式(顶读或底读),以减少孔间荧光干扰并确保检测准确性。具体建议如下:(1)顶读模式酶标仪:推荐使用黑色96孔酶标板(如Greiner或Corning公司产品)。黑色酶标板可有效吸收背景荧光,降低相邻反应孔间的荧光串扰,提升检测信号的特异性和信噪比。…
使用酶标仪代替Qubit检测时,酶标板的选择及波长设置建议如下:(1)酶标板选择:建议使用黑色酶标板,以减少背景荧光干扰,确保检测结果的准确性。(2)波长设置:激发光(Ex=)为480 nm,发射光(Em=)为520 nm。
DNA分选纯化磁珠基于固相载体可逆化固定(SPRI)技术,其磁珠buffer中主要包含磁珠、DNA、PEG及盐离子(主要为Na+)等成分。具体原理如下:(1)在PEG和NaCl作用下,DNA分子因脱水缩合导致构象改变并发生聚集沉淀;(2)当使用无酶水或TE等低盐、低PEG含量的缓冲液时,结合的DNA…
磁珠分选基于不同PEG(聚乙二醇)浓度和盐离子浓度下,不同长度DNA的构象差异,以及长片段DNA带有更多负电荷的特性,实现对特定长度DNA的优先吸附。具体分选流程通常包括两轮磁珠操作:(1)第一轮磁珠结合分子量较大的DNA,通过磁分离去除磁珠(即丢弃磁珠),此时目的大小的DNA保留在上清中;(2)第…
本产品12601ES暂不建议用于纯化或回收150bp以下的片段。若需回收100bp左右及以上的片段,建议选用货号12600的产品,该产品对50bp以上片段的回收率可能存在一定影响,使用时请结合具体实验需求评估。
本公司磁珠可吸附双链DNA和单链DNA,但无法区分单链与双链DNA。若需纯化单链DNA,其纯化倍数可参考本公司对应双链DNA纯化产品的说明书进行操作。
12601ES为非特异性吸附磁珠,在吸附DNA的同时也会吸附RNA。若需去除样本中的RNA,建议使用RNase A进行处理。
本产品暂不建议用于RNA纯化和分选。虽然磁珠可吸附RNA片段,但本产品配套Buffer是根据DNA特性设计的,不利于RNA结构的稳定。若需进行RNA纯化,建议使用专门的RNA纯化磁珠(货号12602ES))。
本产品的RNA结合载量无具体参考值,建议参照使用说明书中的体系进行操作。单次反应若为50μL体积的样本,使用1.8~2倍磁珠(即100μL磁珠)时,可纯化0.5~5µg RNA。
本产品可以回收小RNA。需要注意的是,本产品的回收率未针对小RNA进行专门测试,通常适用于总RNA(Total RNA)的纯化。
正常磁珠在静置状态下,微珠会与缓冲液(buffer)自然分层并聚集于瓶身底部;使用前需进行震荡混匀操作,使微珠均匀分散在缓冲液中。若磁珠出现以下非正常状态,可能表明其均一性受影响:(1)磁珠粘稠度异常升高,无法通过常规震荡充分分散;(2)磁珠聚集成块,肉眼可见明显的块状聚集物;(3)磁珠出现挂壁现象…
RNA磁珠主要用于RNA的纯化,例如12602ES:货号的RNA 纯化磁珠;12603货号的真核生物完整mRNA 抓取磁珠,可用于真核生物完整mRNA的特异性捕获。
磁珠沉淀异常可能由以下原因导致:(1)样本问题:样本中含高浓度糖类或蛋白质,可能影响磁珠与目标物质的结合效率;或样本buffer与磁珠buffer的成分存在冲突,干扰磁珠的分散性和吸附性能。(2)磁珠问题:磁珠 buffer 被污染,可能引入杂质影响磁珠的正常功能。(3)操作问题:干燥时间过长(一般…
本产品的磁珠不可以重复使用。原因是乙醇洗脱步骤会影响磁珠表面活性基团的性能,进而可能导致后续实验效果不稳定或失效。
不建议使用DNA纯化磁珠代替RNA纯化磁珠。原因如下:(1)RNA分子结构相对脆弱,对环境因素(如温度、pH、酶污染等)更为敏感,DNA纯化磁珠的体系设计通常更侧重于DNA的吸附与洗脱,可能无法有效维持RNA的结构稳定性,增加RNA降解风险;(2)RNA纯化磁珠的优化体系(如特定的裂解缓冲液、盐浓度…
磁珠未开封时建议4℃保存,开封后若长期室温放置可能会影响其回收性能,因此不建议室温长时间放置。使用完毕后,建议立即将磁珠重新密封并放回4℃环境保存。PEG(聚乙二醇)的分离效果易受pH值、温度等因素影响,操作时需注意控制相关条件以确保实验结果的稳定性。
磁珠回收率低可能的原因及对应建议如下:(1)磁珠与待处理物质(如DNA )混匀不充分,导致磁珠未能充分吸附目标物质。建议在反应体系中充分混匀磁珠与待处理物质,确保充分接触。(2)磁珠比例设置不当。请严格按照产品说明书推荐的比例选择磁珠用量,以保证最佳吸附效果。(3)孵育时间不足。为确保磁珠与目标物质…
若磁珠仅短暂放置于-20℃且未结冰(即未发生冻结),通常不影响其后续使用。但需注意:(1)若磁珠长时间处于低温环境(如过夜或更长时间),可能导致其结构稳定性下降,进而影响分选或纯化性能;(2)建议在使用前对磁珠进行一次短时间的室温平衡,以确保其充分恢复活性。实际使用效果可能因具体产品特性及实验条件存…
本产品需根据具体仪器类型选择合适的参比染料(如ROX),以确保实验数据的准确性和可靠性。不同仪器可能对参比染料的兼容性和浓度有特定要求,建议参考仪器操作手册或本公司技术支持文档进行匹配。