Q:
文库条带弥散,没有核小体峰,片段分布范围广?
(1) 细胞或细胞核完整性不足,细胞膜或核膜破裂导致核酸提前释放,引发非特异性酶切。建议在细胞或细胞核提取过程中,通过台盼蓝染色镜检细胞活性及细胞核完整性,确保样本质量。(2)PCR扩增条件不合适,循环数过高会导致大片段非特异性扩增,进而造成条带弥散。(3)若采用抗体、磁珠等方法进行富集,需排查相关操作步骤是否存在问题,如富集效率、特异性等。
文库条带弥散,没有核小体峰,片段分布范围广?
(1) 细胞或细胞核完整性不足,细胞膜或核膜破裂导致核酸提前释放,引发非特异性酶切。建议在细胞或细胞核提取过程中,通过台盼蓝染色镜检细胞活性及细胞核完整性,确保样本质量。(2)PCR扩增条件不合适,循环数过高会导致大片段非特异性扩增,进而造成条带弥散。(3)若采用抗体、磁珠等方法进行富集,需排查相关操作步骤是否存在问题,如富集效率、特异性等。