20512ES孵育法纯化的步骤？

1)根据纯化的样品量，取适量填料加入离心管中，1000 rpm离心1min，吸弃上清；
向离心管中加入5倍介质体积的平衡液清洗介质，1000 rpm离心1min，吸弃上清; 重复两次以上。
加入样品，封闭离心管，4℃振荡孵育2-4 h或者37℃孵育30 min-2 h。
孵育结束后，1000 rpm离心1min，吸弃上清，上清保留作为流穿，用于电泳鉴定。
用5倍介质体积的洗杂液清洗介质，1000rpm离心1min，去除上清 (注意不要吸到介质) ，重复3-5次，中间建议换新离心管。
直接在凝胶中加loading buffer,煮沸，11000rpm离心1min离心，取上清跑胶。