News翌圣Dil-Ac-LDL高效标记“人工主动脉瓣膜内皮细胞”，实现无病毒、无iPSC的体内长期移植

瓣膜性心脏病（VHD）在世界范围内发病率高，导致患者死亡的常见心血管疾病。瓣膜置换术是该疾病晚期最常用最有效的治疗方式，目前最先进的治疗方法是使用橡胶和金属制成的生物人工瓣膜或机械瓣膜进行瓣膜置换，但生物人工瓣膜或机械瓣膜不仅存在钙化衰败、出血栓塞等问题，而且无生长和再生能力，这对儿童瓣膜病患者是一个极大的挑战。因此，研发具有生长和再生能力的细胞化组织工程瓣膜是临床的迫切需求。

虽然诱导多功能干细胞iPSCs可通过重编程转化为成体细胞，为组织工程种子细胞来源提供思路，但是iPSCs的潜在致瘤性限制了它的临床应用。为了解决这个难题，2025年3月，华中科技大学生命科学与技术学院陈俊威教授和同济医学院附属协和医院董念国教授团队在国际权威杂志《Bioactive Materials》上发表了一篇题为《Engineering aortic valves via transdifferentiating fibroblasts into valvular endothelial cells without using viruses or iPS cells》的研究论文，研究人员以人原代皮肤成纤维细胞为起点，通过安全的小分子化合物、细胞因子以及基质硬度的联合调控，将皮肤成纤维细胞直接诱导转分化为主动脉瓣膜内皮细胞。将该细胞与PGG交联的脱细胞瓣共培养，构建形成新型组织工程主动脉瓣。

图1.力化联合诱导皮肤成纤维细胞转分化为主动脉瓣膜内皮细胞，使猪心脏瓣膜具有生物相容性

Step 1：细胞接种到PGG-交联脱细胞猪瓣膜，37℃孵育24 h。

Step 2：加入Yeasen Dil-Ac-LDL（1:100，即 10 µg/mL），37℃避光4 h。

Step 3：PBS 轻柔冲洗3次，4% PFA固定10 min。

Step 4：Calcein-AM 染活细胞（绿色），Hoechst或DAPI染核（蓝色），共聚焦3D重建即可。

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