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mRNA疫苗原料KNOWLEDGE BASE

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Case StudiesDNase I:RNA样本gDNA污染去除操作流程

RNA作为实验室常研究的样本,其质量的高低会直接影响实验数据的质量。一般在RNA提取过程中无法完全避免gDNA残留,因此,在进行对RNA纯度要求较高的实验之前,通常建议对RNA样本进行DNase I处理,消化残留的gDNA。消化gDNA步骤可以在RNA提取期间、RNA提取后或者RNA反转录之前进行。需提前去除gDNA的实验一般包括:mRNA表达量分析、转录组

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Case StudiesDNase I:在RNA建库中去除rRNA操作流程

在生物体内,rRNA丰度高且非常保守,其对于获取生物信息研究意义不大。然而,实验过程中提取到的总RNA中有95%是人源rRNA,这些rRNA的存在可能会干扰靶标RNA的检测。因此,在RNA建库测序中,通常会先将rRNA去除。目前,rRNA的去除方式以RNA酶消法为主,其主要操作步骤与原理如下:图1. rRNA去除流程[2]本文基于《Nucleic Acids

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Case StudiesDNase I:体外转录(IVT)中DNA模板降解操作流程

在 mRNA 疫苗、体外转录 RNA(IVT RNA)、长链 RNA 制备等高端应用中,转录后残留的质粒 DNA 模板是影响 RNA 纯度、安全性与下游实验可靠性的关键污染物。尤其在 mRNA 疫苗研发(如 CureVac 新冠 mRNA 疫苗体系)中,必须严格去除 DNA 模板,避免残留 DNA 带来的免疫原性异常、假阳性扩增与生物安全风险。图1. 线性化

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