应用方向精品推荐|快速、高产的RNA体外合成方法
精品推荐 | 快速、高产的RNA体外合成方法
精品推荐 | 快速、高产的RNA体外合成方法
基因治疗领域的后起之秀--mRNA疫苗
mRNA体外合成整体解决方案
限制性内切酶被称为DNA研究中的“手术刀”,自发现以来推动了许多基础生物学研究和商业化应用的发展。在往期的文章中已经对限制性内切酶做了详细介绍:干货|限制性内切酶知多少?今天为大家介绍IIs型内切酶。
关注
在这一过程中,T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)扮演着至关重要的角色,它能够高效地催化体外合成mRNA的过程。
创新型酶改造技术打造“低毒”T7 RNAP突变体,为mRNA药物安全应用保驾护航
本文解析 mRNA 体外转录的四大关键阶段,依次说明模板制备、转录反应、修饰加工、纯化质控的技术要点与优化策略,同时介绍翌圣针对该全流程打造的 GMP 级产品矩阵和一站式解决方案,助力技术落地。
RNA作为实验室常研究的样本,其质量的高低会直接影响实验数据的质量。一般在RNA提取过程中无法完全避免gDNA残留,因此,在进行对RNA纯度要求较高的实验之前,通常建议对RNA样本进行DNase I处理,消化残留的gDNA。消化gDNA步骤可以在RNA提取期间、RNA提取后或者RNA反转录之前进行。需提前去除gDNA的实验一般包括:mRNA表达量分析、转录组
在生物体内,rRNA丰度高且非常保守,其对于获取生物信息研究意义不大。然而,实验过程中提取到的总RNA中有95%是人源rRNA,这些rRNA的存在可能会干扰靶标RNA的检测。因此,在RNA建库测序中,通常会先将rRNA去除。目前,rRNA的去除方式以RNA酶消法为主,其主要操作步骤与原理如下:图1. rRNA去除流程[2]本文基于《Nucleic Acids
在 mRNA 疫苗、体外转录 RNA(IVT RNA)、长链 RNA 制备等高端应用中,转录后残留的质粒 DNA 模板是影响 RNA 纯度、安全性与下游实验可靠性的关键污染物。尤其在 mRNA 疫苗研发(如 CureVac 新冠 mRNA 疫苗体系)中,必须严格去除 DNA 模板,避免残留 DNA 带来的免疫原性异常、假阳性扩增与生物安全风险。图1. 线性化