News上新 | ASO长链合成困境：T3 DNA连接酶，能否成为破局关键？
反义寡核苷酸（ASO）药物作为精准靶向 RNA、破解遗传病与肿瘤等疑难疾病的 “分子利器”，正以不可替代的治疗价值重塑生物医药格局，其临床管线扩张迫切需要高效合成技术支撑，而当前合成环节却深陷多重瓶颈。传统固相合成制备 20 nt 以上长链 ASO 时，收率断崖式下跌、杂质难分离，纯化成本剧增；酶促路径中，T4 DNA Ligase对 PS、LNA、2'-M
传统固相合成制备 20 nt 以上长链 ASO 时，收率断崖式下跌、杂质难分离，纯化成本剧增；
酶促路径中，T4 DNA Ligase对 PS、LNA、2'-MOE 等临床关键修饰容忍度极低，易引发副反应或效率骤降，工程化 RNA Ligase则改造难度大、适配性有限。
T3 DNA 连接酶的出现打破长片段合成僵局：无需工程改造，即可高效耐受 PS、LNA、2'-MOE 等核心修饰，轻松实现 20-120 nt 多修饰长链 ASO 合成。
图1. 不同路径ASO药物合成原理示意图[1]
翌圣生物正式推出T3 DNA Ligase (Cat#14965)，为高效、灵活的ASO药物合成提供全新可能。
翌圣T3 DNA Ligase (Cat#14965)
T3 DNA Ligase 来源于T3噬菌体，它是一种ATP依赖型双链DNA连接酶，该酶可以有效地催化双链DNA中相邻的5’-磷酸与3’-羟基之间形成磷酸二酯键。T3 DNA Ligase 可以有效催化粘性末端分子间或平末端分子间的连接，也能修复双链 DNA 或DNA-RNA 杂交双链上缺刻修复。缺刻修复时，完整链为DNA，缺刻链5’端和3’端分别为DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-DNA或RNA-RNA都可以被T3 DNA Ligase修复。此外，T3 DNA Ligase 对NaCl的耐受性较T4 DNA Ligase更高，为高效、灵活的克隆与建库提供全新可能。
应用场景
分子克隆；
将连接子或接头与双链 DNA 相连；
ASO药物长链合成；
线性 DNA 环化；
双链 DNA 切刻位点连接；
用于生成DNA-RNA融合连接的核酸；
用于基于DNA模板的RNA连接以形成较长的RNA片段。
产品优势
蛋白浓度≥99%；
残留低：无核酸外切酶、切口酶、非特异性核酸、RNase酶残残留；
活性强：媲美进口品牌。
性能验证数据
使用翌圣和来自进口Supplier A*的T3 DNA Ligase分别按照不同投入量加入体系中对5 pmol带有黏性末端的底物进行连接实验。结果表明，翌圣产品能高效连接底物，连接效果与进口产品不相上下。
图2. T3 DNA Ligase连接效果验证
无论是生物医药技术创新研发，还是分子生物学基础研究，翌圣生物始终以优质产品赋能科研与产业升级。即刻锁定翌圣 T3 DNA Ligase (Cat#14965)，解锁 ASO 合成新范式，加速生物医药创新成果落地！
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T4 RNA ligase 2, truncated KQ | miRNA建库(3'端接头连接) |
参考文献：
[1] Sabat N, Stämpfli A, Hanlon S, et al. Template-dependent DNA ligation for the synthesis of modified oligonucleotides[J]. Nature Communications, 2024, 15(1): 8009.
[2] Bizat P N, Sabat N, Hollenstein M. Recent advances in biocatalytic and chemoenzymatic synthesis of oligonucleotides[J]. ChemBioChem, 2025, 26(9): e202400987.
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