Techniques不止于胆固醇：低密度脂蛋白LDL在肥大细胞诱导中的关键使命
肥大细胞（mast cell）又称组织嗜碱细胞，与嗜碱性粒细胞共同起源于骨髓造血干细胞。血液循环中存在的祖细胞在局部特定因素（如干细胞生长因子、IL-3等）的刺激下进一步发育成为成熟的肥大细胞。肥大细胞在多种疾病的发病机制中发挥关键作用，包括过敏性和自身免疫性疾病，支持这些观点的大多数事实来自动物疾病模型，特别是肥大细胞缺陷小鼠模型。相比之下，肥大细胞在人类
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Techniques你吃的羊肉串里，可能没有羊——揭秘食品界的“DNA神探”——扩增子技术
这项技术有多厉害？全国首个肉类掺假检测的高通量测序方法团体标准已经发布，扩增子测序法正式成为官方认可的检测手段。美国FDA也已将DNA条形码列为鱼类制品鉴定的官方方法。
Techniques基于MGISP-960自动化平台的人血液gDNA样本重测序文库构建方法
全基因组重测序是挖掘基因组变异、开展遗传研究的核心技术，传统血液gDNA文库构建多依赖人工操作，存在通量低、重复性差、人为误差大等问题，难以满足大批量样本测序需求。本文基于MGISP-960高通量自动化样本制备平台，优化建立血液gDNA重测序文库构建方法。该方法实现建库全流程自动化操作，有效规避人工操作偏差，提升文库构建效率与均一性，流程稳定可控，可适配大批
Techniques病原tNGS如何“去宿主”（panel限制不会扩增宿主）
一、背景介绍：宿主核酸的“干扰困境”在感染性疾病诊断中，临床样本（如血液、肺泡灌洗液、脑脊液、痰液等）往往含有海量的人源宿主核酸。以血液样本为例，人源DNA可占总核酸量的99%以上，而病原微生物的核酸信号——尤其是早期感染或低载量病原——极度微弱，犹如“大海捞针”。传统宏基因组测序（mNGS）虽然可以无偏倚地检测样本中的所有核酸，但因其“一网打尽”的策略，测
Techniques单细胞转录组测序在药物研发中的应用
一、背景介绍在传统的药物研发范式中，高通量药物筛选与靶点发现通常依赖于批量（bulk）水平的转录组或蛋白质组检测。传统化学遗传学方法虽然在将化合物与细胞表型联系起来方面发挥了重要作用，但往往依赖于批量水平的测量，掩盖了重要的细胞异质性信息，限制了对药物作用机制的深入理解。单一肿瘤组织内既包含处于不同增殖状态的恶性细胞，也包含免疫细胞、基质细胞等多种非恶性细胞
Techniques三代测序在地中海贫血中的应用
在分子诊断实验室的日常工作中，地中海贫血（Thalassemia，简称"地贫"）的基因检测堪称一项"经典挑战"。作为全球最常见的单基因遗传病之一，地贫在我国南方地区携带率高达11%~24% 。然而，当我们面对那些PCR结果与电泳表型"对不上"的疑难样本，或是产前诊断中遇到的罕见缺失型突变时，传统的Gap-PCR和Sanger测序往往显得力不从心。近年来，以P
Techniques血浆中微生物细胞游离DNA宏基因组测序
血液是人体内信息最丰富的液体之一。当病原体入侵机体后，其细胞在凋亡或坏死过程中释放出的DNA片段会进入血液循环，形成微生物细胞游离DNA（microbial cell-free DNA, mcfDNA） 。这些短小的DNA片段如同病原体在血液中留下的“分子足迹”，记录着感染事件的真实信息。以宏基因组下一代测序（metagenomic next-generat
Techniques三代测序在PGT中的应用
染色体数目异常、结构重排和单基因遗传病是导致胚胎发育失败、反复流产及出生缺陷的三大类遗传因素。胚胎植入前遗传学检测（Preimplantation Genetic Testing, PGT）通过检测体外培养胚胎的遗传物质，在移植前筛选出健康的整倍体胚胎，从源头上阻断遗传病向子代传递。长期以来，PGT主要基于二代测序和微阵列技术。然而，传统方法高度依赖完整家系
Techniques三代测序在新生儿基因筛查中的应用
新生儿疾病筛查是出生缺陷三级预防的最后一道关键防线。我国新生儿筛查率已超98.5%，但传统生化检测与二代测序（NGS）仍存在明显短板：复杂疾病检出不全、阳性召回周期长、2周内确诊率偏低、假阳性/假阴性难以避免。《出生缺陷防治能力提升计划（2023—2027年）》明确提出：遗传代谢病力争2周内诊断、2周内治疗，听力障碍3个月内诊断、6个月内干预，核心目标已从“
Techniques单细胞测序表观新技术：单细胞 CUT&Tag 原理、流程与技术优势
表观遗传调控是基因表达、细胞命运决定、疾病发生发展的核心分子基础，传统染色质研究技术难以解析单细胞水平的异质性信息。单细胞CUT&Tag（scCUT&Tag）将原位靶向切割与单细胞条码标记技术融合，突破了传统ChIPseq样本需求量大、信噪比低、操作繁琐的瓶颈，实现单细胞分辨率的蛋白DNA互作与染色质修饰图谱绘制。翌圣生物依托自主研发的高活性pA/GTn5转
TechniquesNGS技术在肿瘤诊疗全周期管理中的价值
在全球公共卫生领域，肿瘤始终是威胁人类健康的重大顽疾，是影响国民健康、制约社会发展的主要公共卫生问题之一。传统肿瘤诊疗依赖影像学检查、组织病理学分析及单基因检测，存在诊断滞后、治疗盲目、预后监测不足等痛点，难以满足精准医疗需求。近年来，下一代测序（Next-Generation Sequencing, NGS）技术快速发展，凭借高通量、高灵敏度、高准确性的核
Techniques靶向二代测序在结核病和耐药结核病诊断中的应用价值
结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染性疾病，长期位居全球传染病致死前列，其中耐药结核病因治疗周期长、治愈率低、传播风险高，已成为全球结核病防控的重大难题。传统结核检测方法存在检出慢、耐药谱不全、灵敏度有限等短板，难以满足快速精准诊疗需求。靶向二代测序（靶向 NGS）凭借高特异性、高通量、快速检测的特点，为结核及耐药结核的早期诊断、耐药基因筛查、分子分型溯
Techniques重测序与捕获测序技术：原理、差异及场景化选择指南
随着高通量测序技术的飞速发展，基因组测序已从基础的全基因组扫描，逐步细化出适配不同科研场景、成本预算、研究目标的细分技术体系。在群体遗传研究、疾病靶点筛查、分子育种、变异检测等主流科研领域，全基因组重测序、低深度重测序、液相杂交捕获测序、固相杂交捕获测序四大技术应用最为广泛。 四种技术依托高通量测序平台实现基因序列解读，但在测序范围、测序深度、实验原理、成本
Techniques为什么CQ氯喹处理后的细胞使用溶酶体探针染色反而更亮
染色示例图1、用共聚焦显微镜观察在10% FBS 、Pristane或氯喹 (CQ，30μM) 处理20 小时的RAW264.7 细胞中的溶酶体，溶酶体使用LysoTracker Green DND26（50 nM）和Hoechst 33342（5 µg/ml）进行染色[1]。图2、用共聚焦显微镜观察在对照、Baf A1 (100nM，5h) 、CQ（100
Techniquesqpcr中的常见荧光化学物质都有哪些区别？
做qPCR实验的朋友，每天都要跟荧光染料打交道。面对SYBR Green、TB Green、EVA Green这些名字，你是否也有过疑惑：它们不都是绿色荧光的DNA结合染料吗？到底有什么区别？今天我们就来把这“三剑客”的底细扒一扒。SYBR Green I：最经典的“老大哥”SYBR Green I可以说是qPCR染料法的元老，绝大多数实验室都跟它打过交道。
TechniquesRNA的二级结构如何成为影响逆转录效率
在进行RT-qPCR实验过程中，逆转录实验是将RNA信息“逆向”转录为cDNA的关键步骤，属于一个承上启下的实验过程，被广泛应用于基因表达分析、病毒研究和RNA测序等领域。然而，这个看似成熟的流程，实则隐藏着一个容易被忽视却又至关重要的变量——RNA自身的二级结构。1.什么是RNA二级机构？由分子内碱基配对形成的局部发夹、茎环乃至更复杂的空间折叠都可以称之为
Techniques反转录核心原理详解
逆转录（Reverse Transcription）是我们破译基因表达信息的核心工具之一。无论是做qPCR看基因表达量，还是做基因克隆，第一步都是将不稳定的RNA“翻译”成稳定的cDNA——这个过程的成败，直接决定了后续实验的走向。今天，就带大家深入理解逆转录的原理，并梳理那些决定实验成败的关键因素。一、逆转录的本质：一场“反向”的信息传递在经典的“中心法则
Techniques攻克扩增难题高GC含量，复杂二级机构，长片段的终极方案
做PCR最怕什么？模板GC含量高非常难打开，二级结构复杂怎么都扩不出，或者片段太长跑出一条弱带甚至什么都没有——这些场景遇上一个就够头疼了。Hieff Canace® Veritas Long PCR Master Mix（10166ES） 就是为这些"困难户"量身打造的终极方案。🎯三大硬核能力，专治疑难模板🔥 长片段：DNA 40 kb / cDNA 14
Techniques提高cDNA长度与产量的5个核心技巧
做反转录（RT-PCR）时，最令人沮丧的莫过于：明明提的RNA质量很好，跑胶也看到清晰的条带，但做出来的cDNA要么浓度极低，要么全长基因永远扩不出来。其实，cDNA的长度和产量，并不只取决于RNA质量，更多取决于你对反转录酶“脾气”的拿捏。以下是经过实战检验的5个技巧，帮你把cDNA的“质”和“量”都拉满。1. RNA的二级结构是长cDNA的头号天敌想要获
TechniquesCas9蛋白基因编辑常见问题解答
一、基础知识Q1：Cas9蛋白（RNP）与Cas9质粒（pDNA）、Cas9 mRNA有什么区别？A1：生物形式优点局限性pDNA形式l易于构建l操作简单l成本低l尺寸过大增加CRISPR系统递送和表达的难度lpDNA转录、翻译过程会降低编辑效率lCas蛋白长时间存在于细胞中，会导致更高的脱靶效应l有随机整合的风险，对细胞基因组的影响不可预测mRNA形式（C
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