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Applications产品推荐|细胞转染老兵：磷酸钙法细胞转染试剂！

📂 细胞转染 Type ID 5003

👁 19,847 views 🗓 2026-10-10 Source ID：3728

翌圣生物的磷酸钙法细胞转染试剂，基于传统方法优化，提高转染效率，减少细胞毒性，特别适合HEK293、293T和Hela等细胞系。适用于瞬时和稳定转染，即开即用，操作简便。

Source: Yeasen Biotech ｜ Original: https://www.yeasen.com/solutiondetail/3728 ↗

磷酸钙转染试剂是一种经典的基因转染工具，它通过形成DNA-磷酸钙共沉淀物，促进细胞通过内吞作用吸收DNA，适用于多种真核细胞的瞬时和稳定转染，以其操作简便、成本低廉、转染效率高而广受欢迎。

基本原理

DNA与磷酸钙的结合

在含有磷酸盐的缓冲液（HBS）中，加入氯化钙（CaCl₂）溶液和含有目的DNA的溶液。

DNA分子在生理pH条件下带负电荷，而磷酸钙带正电荷，通过静电作用，DNA与磷酸钙结合。

形成DNA-磷酸钙共沉淀物

当DNA与磷酸钙混合后，会形成DNA-磷酸钙共沉淀物。这些沉淀物是微小的DNA-磷酸钙复合体，它们可以吸附到细胞表面。

细胞吸收共沉淀物

将形成的DNA-磷酸钙共沉淀物添加到待转染的细胞培养基中。细胞通过内吞作用吸收这些共沉淀物。

DNA进入细胞

内吞后的DNA-磷酸钙复合体被包裹在内吞体内，随后内吞体与溶酶体融合，DNA被释放到细胞质中。

DNA的表达

释放到细胞质中的DNA可以通过细胞的核孔复合体进入细胞核，进行蛋白表达。

产品特点

性能稳定：可在2-8℃保存，有效期2年；
转染效率高：在293T细胞上阳性率高达95%；
毒性低：对细胞基本无毒，转染后不影响细胞正常生长。

结果展示

6孔板中，使用翌圣磷酸钙法细胞转染试剂在293T细胞上转染GFP质粒，按照转染试剂说明书进行操作；转染48 h后，荧光倒置显微镜下观察并拍照。结果显示，翌圣磷酸钙法细胞转染试剂在293T细胞上的转染效率高达95%以上。

293T细胞（6孔板）

操作方法

按照60％左右的密度种植细胞入培养皿（瓶），细胞贴壁生长12-24小时后即可准备转染；

准备1.5 mL离心管，按照下表指示，依次加入DNA、HBS和CaCl₂；

振荡混匀后室温静置15分钟；

吹打3－5 次后均匀加到待转染细胞的培养液中，轻轻摇动培养皿（瓶）；

放置37℃，5%CO₂培养箱中进行细胞培养；

转染6小时后换液；

24-48小时检测目的蛋白质的表达。

不同培养容器试剂使用量（仅供参考）

细胞培养试剂	6孔板	T-25培养瓶	10 cm平皿
培养基（mL）	2	5	10
DNA（μg）	2	4	7.5
HBS（mL）	0.2	0.5	1
CaCl₂（μL）	14	35	70

产品信息

产品名称	产品规格	产品货号
Hieff Trans^®Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂	200T	40803ES70

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货号	40801ES	40802ES	40807ES	40809ES	40810ES	40821ES	40824ES	40825ES	40828ES	40829ES	40830ES
产品名称	LipoBooster 3000转染试剂	Liposomal 2000脂质体转染试剂	RNAiBoost 转染试剂	mRNA 转染试剂	昆虫细胞转染试剂	PEI -GMP 转染试剂	UltraAAV- GMP转染试剂	UltraLV 转染试剂	UltraProFect-CHO瞬转表达试剂盒	UltraProFect-293瞬转表达试剂盒	UltraProFect蛋白瞬转表达转染试剂
细胞类型	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	昆虫细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞	常规细胞
	难转染		难转染	难转染
	原代		原代	原代
	干细胞		干细胞	干细胞
核酸类型	DNA	DNA			DNA	DNA	DNA	DNA	DNA	DNA	DNA
	siRNA		siRNA
	miRNA		miRNA
	ASO		ASO
	mRNA			mRNA
应用场景	用于各种核酸及原代等难转染细胞系	普遍用于多种细胞DNA转染	用于siRNA和miRNA转染，在多种难转染细胞上均能高表达	mRNA转染专用，在多种难转染细胞上均能高表达	针对sf9和High Five等昆虫细胞进行杆状病毒及质粒DNA转染	通用型病毒包装转染试剂（适用于LV及AAV）	AAV病毒包装专用转染试剂	LV慢病毒包装专用转染试剂	CHO悬浮细胞瞬转表达蛋白、抗体，含转染试剂、培养基、补料	293悬浮细胞瞬转表达蛋白、抗体，含转染试剂、培养基、补料	用于抗体、蛋白、细胞因子等瞬转表达，满足CHO及293悬浮细胞系需求
对标竞品	thermo-lipo3000	thermo-lipo2000	thermo-RNAiMAX	thermo-Messenger MAX	thermo-Cellfectin	polyplus-PEIpro GMP	polyplus-FectorVIR-AAV GMP/ PEIpro	polyplus-FectorVIR-LV/PEIpro	thermo-ExpiCHO 瞬转试剂盒	thermo-Expi293 瞬转试剂盒	polyplus-FectorPRO

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