应用方向猪“坚强”，猪瘟病毒检测利器来袭！

2020年终究是不平凡的一年，新冠疫情未息，多种感染性恶疾持续威胁：非洲猪瘟、猪流感、鼠疫...

虽然国内新冠肺炎病毒阻击战尚且在控制范围，但以上事件均表明，人与自然的斗争从未停歇，感染性疫情的反弹或再次流行随时都可能发生。其中非洲猪瘟的再次爆发让人警醒，自2018年8月份国内首次爆发非洲猪瘟疫情，到2020年非洲猪瘟疫情时不时爆发，不断提醒我们猪瘟之战，仍需继续！

非洲猪瘟1921年首次出现于非洲肯尼亚，早期一直存在于撒哈拉以南的非洲国家，这就是后来被命名的非洲猪瘟（African SwineFever，ASF）。非洲猪瘟是非洲猪瘟病毒（African Swine FeverVirus，ASFV）引起猪的一种急性、烈性、高度接触性传染病。ASFV是非洲猪瘟病毒科的唯一成员，病毒结构庞大而复杂，基因组全长170-194kb，编码200多种蛋白，是一种具有20面体结构、带囊膜的呈线性双链DNA。临床表现为发热、呼吸困难、皮肤发绀、粘膜出血等症状。非洲猪瘟的发病率和死亡率可达100%，严重危害着全球养猪业，造成难以估量的经济损失。世界动物卫生组织（OIE）将其列为法定报告动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

除了非洲猪瘟外，猪类传染病还有蓝耳、口蹄疫和流感病毒等。其中猪瘟病毒不同于非洲猪瘟病毒，猪瘟俗称"烂肠瘟"，是猪瘟病毒引发的一种感染性疾病。猪可见高热、运动失调、后肢无力、皮肤出现不同程度红色或紫色的出血点。具有高发病率、高死亡率的特点。猪瘟病毒（HCV或CSFV）是一种单股线状正链RNA病毒，基因组大小仅12 kb，OIE将其列为A类法定传染病。

图1.常见猪瘟病毒

虽然非洲猪瘟不是人畜共患病，但对猪有致命危险。一旦发现猪瘟疫情，所有生猪均会被扑杀并无害化处理，从而间接影响人们的日常生活。因此非洲猪瘟检测必不可少。此外非洲猪瘟尚无疫苗和有效的治疗手段，主要通过实验室诊断方法对非洲猪瘟进行监控和控制。非洲猪瘟病毒检测一般可从血清学和病原学两个方面综合检测，在所有的检测技术中，荧光定量PCR法是OIE推荐使用的非洲猪瘟常规诊断的重要工具，也是中国在目前非洲猪瘟流行情况下首选的检测技术。

图2.非洲猪瘟病毒（ASFV）检测手段

翌圣生物作为长期专注于分子酶原料及建库试剂盒等产品研发和生产的高新技术企业，长期提供大量高质量的检测用酶原料，在新冠疫情期间积极贡献力量。此次也将备战非洲猪瘟检疫工作，提供猪瘟检测完整解决方案，满足非瘟检测高灵敏度、快速检测的要求，助力动物疫病检测防治企业。

病毒DNA/RNA提取试剂盒可兼容不同的样本类型，应用独特的裂解液释放样本中的核酸，配合高效新型材料的吸附柱可大限度的回收高纯度病毒核酸。可适用于各种下游应用实验，如酶切、PCR、反转录和RT-PCR、NGS等。

应对非洲猪瘟病毒，荧光PCR仍然是目前国际上认可的敏感、特异的检测技术，是目前非洲猪瘟流行情况下首选的检测技术。

非洲猪瘟 ASFV/ACT双质粒终体系100000、10000、1000、100拷贝，每组3个重复

灵敏度测试--非洲猪瘟 ASFV/ACT双质粒，终体系5拷贝，每组8个重复，检出率测试。

图3. Hieff Unicon® TaqMan qPCR检测稳定性