Applications干细胞培养的好搭档—高活性高纯度细胞因子

一、干细胞定义

人体是由称作受精卵的单细胞发育而成，成年人共有大约85万亿个细胞，其中每天发生更新的细胞会超过1500亿个。所有这些细胞均来源于一个非常小的细胞群体，即所谓的“胚胎”和“成体”干细胞。这些细胞具有长期自我更新能力和向多种细胞系分化的能力，干细胞的更新和分化是由一系列表观调控因子和多种细胞因子决定的。

二、干细胞分类

三、干细胞应用

1.增加对疾病的发生机制的理解

研究人员通过观察干细胞在骨骼、心肌、神经以及其他器官中成熟为细胞，会更好地理解疾病和症状是如何发展的,

2. 生成健康细胞来替代病变细胞（再生医学）

干细胞可以被引导成为特定的细胞，可用于再生和修复人体内病变或受损的组织。例如移植干细胞用于治疗白血病、淋巴瘤、神经母细胞瘤和多发性骨髓瘤等疾病。目前全球有6000多项在研干细胞临床试验涉及上百种疾病。

3. 检验新药的安全性和有效性

在使用药物之前，研究人员可使用一些类型的干细胞来测试药物的安全性和质量。这种类型的检测最有可能首先对药物开发产生直接影响，首先是心脏毒性检测。

4. 抵抗衰老

通过补充外源干细胞抗衰老，是目前最为有效的抗衰老治疗手段。干细胞抗衰老是再生医学中最核心的医疗技术，它最显著的作用就是补充种子细胞替代衰老细胞。

四、干细胞研究相关蛋白

表1.干细胞分化培养常用细胞因子

五、细胞因子产品特点

1. 高生物活性：蛋白的生物活性是蛋白质量好坏的重要的指标。一般使用不同蛋白浓度刺激细胞增值或死亡效果来评价蛋白活性高低。我们的蛋白与竞品相比，具有更低的ED50，更高的蛋白比活性。

2. 低内毒素：为了确保产品的足够安全，产品经过严格的鲎试剂检测法以检测内毒素含量，结果表明，我们的产品内毒素水平< 0.1EU/μg蛋白或者< 0.01EU/μg蛋白。

3. 无标签：具有与天然蛋白一致的序列信息，可以确定蛋白活性是由目的蛋白产生，而不是其他蛋白反应导致，保证了实验结果的可靠性。无标签蛋白用作免疫原时，也可避免产生非特异性抗体。

4. 高纯度：纯度>95%，经还原性、非还原性SDS-PAGE和HPLC双重检测，多种分析方法证明了产品的均一性。

5. 无载体蛋白： PBS保存，不含任何载体蛋白(如BSA、HSA等），仅含有目的蛋白，这样可以确保蛋白活性是由目的蛋白产生的，而不是其他蛋白反应导致，保证了实验结果的可靠性。

6. 微生物污染控制：蛋白溶液均经过0.2 μm的微孔滤膜过滤。

7. 冻干粉：相比于液体，冻干粉稳定性更好，更易长时间储存。

六、细胞因子优势举例

1. 高纯度

IL-5由活化的Th2细胞产生的细胞因子，可刺激嗜酸性粒细胞生长和分化，以二聚体形式发挥生物学作用, 通过链间二硫键紧密连接。

图1. Recombinant Human IL-5 经还原性（R) 电泳和非还原性(N) 电泳、HPLC检测，纯度 >98%.

图2. Recombinant Rat IL-5，经还原性（R) 电泳和非还原性(N) 电泳、HPLC检测和HPLC检测，纯度 >98%

2. 生物活性更高

不同浓度的蛋白诱导小鼠ATDC5 细胞产生碱性磷酸酶，结果显示我们的Human BMP-2 生物活性比进口品牌P高1.5倍。

图3.Measured production of murine ATDC5 cells by inducing alkaline phosphatase

人CXCR2 转染到小鼠BaF3细胞中，不同浓度的Human IL-8趋化细胞，测量迁移到趋化室的细胞数量。结果显示我们的Human IL-8的生物活性比进口品牌P高6.4倍。

图4. Measured in a chemotaxis bioassay using human CXCR2 transfected mouse BaF3 cells

3.与天然蛋白结构一致

IL-12是由p35和p40（IL-12β）两条链组成的异源二聚体，两个亚单位通过二硫键连接在一起。二聚体作用是调节蛋白质信号转导的一种常见形式，拥有正确的二聚体结构，蛋白才能发挥出正确的生物活性。

图5. Human IL-2 电泳图

在非还原性电泳中，Human IL-2的 表观分子量为 60 kDa，在还原电泳中为 41 kDa 和 29 kDa。从检测结果来看，Human IL-12具有与天然蛋白一致的结构。

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