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胶原酶II型和IV型消化小鼠肿瘤组织该怎么选?

实验技术
提问:FlaskOne7532 2026-06-16 浏览 295 4 个回答
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T
TubeLab2319 2026-09-17
胶原酶I/II/IV不是纯度高低,主要差别在酶组分比例,尤其是胶原酶活性与胰蛋白酶样活性的比例。IV型通常胰蛋白酶样活性较低,对细胞表面抗原更温和,适合肿瘤单细胞悬液和免疫细胞;含结缔组织多的小鼠移植瘤可以用IV型作为基础酶,但别靠提高浓度硬消化。
V
Vivi1337 2026-09-19
建议做一个小型梯度:同一肿瘤混匀后分成低、中、高三个酶浓度,固定DNase I和摇速,消化30、45、60 min,比较细胞总数、活率和流式标志。不要只问IV型是不是更适合,用数据定。价格差价通常小于重复失败成本。
检
检测达人 2026-09-21
II型也不是不能用,有些间质丰富的肿瘤用II型消化速度更快,但细胞活率和表面标记保留要看下游实验。价格上同品牌I/II/IV型差别通常不大,进口主要贵在批间稳定性。少量样品建议买小规格,干燥分装保存,避免反复开盖受潮。国产IV型可做初筛,正式实验同一批号留够量。
L
Leo1386 2026-09-22
温和消化我会用IV型+DNase I:把肿瘤剪成1-2 mm³小块,加入含Ca²⁺/Mg²⁺的RPMI 1640或HBSS,37℃慢摇,每15-20 min轻轻吹打并取样查台盼蓝。看到胶状物基本是DNA释放,DNase I能减少细胞结团和死亡;不解决胶状物只加酶量反而伤细胞。
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