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细胞上清IL-2 ELISA复孔差异大,是操作还是板子问题?

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提问:Plate 2026-08-16 浏览 244 4 个回答
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L
LabTech5253 2026-09-22
先从操作上做一次排除实验:取同一份细胞上清,连续分装多孔,按不同加样顺序和洗板手法处理,看CV是否还超15%。如果同一份样本操作优化后CV降下来,就是手法问题;如果仍然边缘高、中间低,再怀疑板子。还要校准移液器,尤其10/100微升档,加样体积误差会被放大。
T
Tom4085 2026-09-18
加样时间太长是复孔CV大的常见原因。边缘孔往往是最先或最后加,反应时间不一致,手动单道加样更容易造成孔间差异。建议改用多道移液器和加样槽,所有孔在5-10分钟内完成;复孔不要挨着放,可以按板内随机或对称分布;洗板时每孔洗液停留时间一致,拍板方向、力度统一,别让边缘孔残留液体不一致。
A
AndyPlate7493 2026-08-28
换进口板或加样槽有帮助,但要看是操作问题还是预包被板质量。即用型盒的板子一般不能单独换成进口板,除非你买的是抗体对自己包被。加样槽用低吸附一次性槽,能减少加样时间。若排除操作和仪器因素后仍边缘高、批内CV大,可以记录批号并联系厂家技术支持,提供原始OD和布板图,一般会安排复测或换货。
蔡
蔡小妹9574 2026-09-17
边缘孔偏高最常见的是孵育时温度不匀和边缘蒸发。恒温箱里板子贴壁或靠近出风口,边缘孔温度可能略高,反应会偏强;如果没贴封板膜或膜没压实,边缘孔液体蒸发也会让浓度升高。建议孵育前检查封板膜四边压实,板子放在孵箱中间、不要靠壁,底部垫一块预热的金属板或平托盘减少温差。
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