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间充质干细胞无血清培养基总是出现絮状沉淀怎么办?

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提问:Plate881 2026-09-14 浏览 203 5 个回答
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Tom6540 2026-08-27
出现P3后沉淀,建议同时查基础培养基和补加因子两个批号。联系厂家技术,提供沉淀照片、出现时间、补加方案和保存条件,要求做外观、浊度和渗透压复核。如果同一批号多瓶出现,即使细胞暂时没问题,也不建议继续用于关键实验,尤其是后续要做诱导或冻存。可换一个小包装不同批号或品牌做对照,看是否仍有析出。每次配2L规模,务必记录基础液、因子、耗材批号,这样能分清是基础液还是补加物引入的。
蒋
蒋实验402 2026-09-01
先别急着定污染。取沉淀悬液做革兰染色和DNA荧光染色,同步取上清接种血平板或做无菌培养;如果无菌且细胞状态没明显下滑,更多是蛋白或脂蛋白析出。无血清体系补加因子后本就容易出现细小絮状,尤其P3以后细胞密度高、代谢物变化,pH和温度波动会促进聚集。建议低速离心取沉淀,看是否松散可吹散;若37℃复温后减少,多为可逆析出。若沉淀有异味、浑浊或染色见菌,立即停用该批并排查操作。
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Lisa9429 2026-09-06
每次配2L,补加因子后一定要再过一次0.22 μm滤膜,不能只依赖基础液已无菌。补加物要用合适溶剂充分溶解,沿壁缓慢加入并搅拌,避免局部浓度过高;水浴温度不要超过37℃,时间不要过长。配好后分装成单次量,避免整瓶反复预热。沉淀如果只在4℃放置后出现、37℃复温后消失,可能是可逆析出;若复温后仍存在,建议停用该批,并做小量复苏测试看细胞能否正常贴壁增殖。
L
LisaScience 2026-09-21
先排除污染,再查血清替代物批次,换一批可能就没有絮状物。
阿
阿宝控176 2026-09-12
我们遇到4度析出,37度水浴摇一下能溶解,但最好过滤后再用。
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