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高通量筛查核酸提取,求适配KingFisher的磁珠法试剂盒

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提问:Lily4093 2026-06-02 浏览 187 4 个回答
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D
DavidReagent 2026-09-12
切换前建议保留柱提法做对比,挑取同一批样本中含内标的低拷贝、中拷贝、高拷贝各若干份,两种方法平行提取,比较Ct差值、纯度和孔间稳定性。试剂盒采购后建立来料验收:每批次取1-2盒做阴阳性质控板,记录提取效率。预分装板最好有条码或批号喷码,方便样本追溯,尤其大规模筛查出问题能定位到批次。注意库存效期管理,先入先出。和供应商约定质量不达标可退换,最好在合同里写明交叉污染和低拷贝检出率验收标准,避免后续扯皮。
S
SampleTech5141 2026-09-22
从柱提法切磁珠法,先做提取效率对比。建议取同一批咽拭子和血清样本,分成梯度浓度组(包括低拷贝、中、高),分别用原柱提法和候选磁珠法提取,测纯度和得率。低拷贝样本能不能稳定检出,不能只看几个孔,建议每个浓度做8-12复孔,计算检出率和Ct SD。若预期低拷贝样本多,选试剂盒时可问是否包含核酸助沉剂或内标,内标能区分提取失败和真实阴性,减少假阴。大体积血清样本洗脱体积要匹配下游qPCR,别只看得率不看洗脱体积。
A
Assay2766 2026-09-22
每天1000份样本,月消耗量很大,建议不要按单盒询价,直接按年用量或半年用量和厂商谈。10盒/箱的大包装通常单价低于单盒,但你要问清楚:价格是否含预分装96孔板、磁棒套、洗脱板等全套耗材,还是只含试剂;是否含税含运费。供货周期要看厂商库存,常见国产现货3-7天可发,但大批量可能要分批排期。磁珠法试剂盒效期一般12-18个月,建议根据实际用量分批到货,比如每月发2-4箱,既保证效期,也减少仓储占压。
生
生工老司机 2026-09-11
孔间均一性要上机验证,不要只看说明书。可设计96孔板交替排布:一列高浓度阳性、一列阴性、再一列低拷贝,跑3-5板,看阳性孔Ct变异,阴性孔是否起峰。交叉污染主要来自磁棒套脱落液体或洗涤不充分,所以选预分装试剂盒时看封膜设计,刺穿后是否容易回弹、液体飞溅少。KingFisher Flex的磁棒套、板型必须和试剂盒匹配,有的国产试剂盒板底偏软或高度不同,会影响磁珠吸附。建议先试1-2盒,做整板阴阳交替验证。
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