HisSep Ni-NTA 6FF Chromatography Column, 1 mL His标签蛋白纯化预装柱，1 mL
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Q：为什么柱子反压过高？
A：可能是样品中含高浓度的核酸，建议延长破碎时间直至粘度降低，或添加DNaseI（终浓度为 5 µg/mL），Mg2+(终浓度 1 mM)，冰上孵育 10-15 min。
Q：为什么洗脱组分中无目的蛋白？
A：可能是表达量太低，建议优化表达条件，使用包涵体纯化缓冲体系。
Q：为什么上样过程中蛋白发生沉淀？
A：若蛋白发生聚集，建议在样品和所有缓冲液中添加稳定剂，如 0.1%Triton X-100 或 Tween-20。
Q：上样量一般是多少？
A： 具体上样量要根据填料的使用时间和载量， 该产品的载量为＞40 mg 6 × His-tagged protein/mL基质。
已发表文献
[1] Guo Z, Long L, Ding S. Characterization of a d-lyxose isomerase from Bacillus velezensis and its application for the production of d-mannose and l-ribose[J]. AMB Express, 2019, 9(1): 149. Ni–NTA agarose gel column and sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis SDS-PAGE) IF:2.226
Anti-Flag亲和纯化凝胶 ——IP/蛋白纯化好帮手
应用方向
