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Q:目标蛋白回收率低怎么办?
A:1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;
2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole浓度;
3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;
4)增加磁珠用量;
5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;
6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。
Q:如何提高目标蛋白纯度?
A:1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的Imidazole和NaCl浓度;
2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;
3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质;
4)延长清洗的时间,增加清洗次数;
5)采用梯度Imidazole浓度洗脱目标蛋白。
Q:是否有测试结果?
A:有,见下图

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