Tick the specs you need to submit them together; or enquire one by one. Cat. numbers are carried into the RFQ.
Q:柱子反压过高是什么原因?
A:填料可能被堵塞:裂解液中可能含微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜(0.22µm 或 0.45µm)过滤,或离心去除。
Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?
A:蛋白可能是包涵体:可通过电泳检测裂解液,分析上清中是否有目的蛋白,包涵体蛋白需按照包涵体蛋白的纯化方式;
Q:洗脱组分不纯(含多种蛋白)是什么原因?
A: 样品中含有其他 His 标签蛋白:通过调节 pH 值或咪唑浓度来优化洗杂条件。再使用其他纯化手段(如去离子交换,疏水等)进一步纯化洗脱组分。
Q:为什么填料颜色会变浅或变成白色?
A:镍离子脱落或者剥离,按照填料再生的操作重新挂镍离子。
Q:产品规格的体积指的是什么?
A:指的是填料的体积,不包括保护液的。
Q:填料流速慢的原因?
A:1.柱子在清洗平衡步骤流速减慢,柱子下筛板堵塞或者是试剂中有杂质堵塞。2.上样过程中流速逐渐降低,样品中有不溶物 堵塞填料或者是样品粘稠。少数情况蛋白挂柱后 流速也会减慢。 3.洗杂洗脱步骤流速减慢,蛋白不稳定 在柱子上沉淀,可以选择低温条件纯化,或者是在整个纯化过程中样品试剂中加入甘油保护蛋白。
Q:说明书步骤的5-10倍柱体积具体指的的是什么?
A:指的是5-10倍的填料体积。
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