Viability/Cytotoxicity Assay for Bacteria Live & Dead Cells 活细菌/死细菌染色试剂盒

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荧光显微镜流式细胞仪细菌活力检测

Product no.40274ES Sizes1 options SourceYeasen · Official

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Overview

Specifications

Brand翌圣生物 Yeasen

Cat.No40274ES

Specification100 T

Origin翌圣生物科技(上海)股份有限公司

技术平台 荧光显微镜 流式细胞仪

应用方法 细菌活力检测评估细菌存活状态及膜损伤情况

适用物种种属细菌

检测方法 荧光染色法

生物特性参数 细胞类型细菌应用活细菌/死细菌染色与活力评估

样本类型细菌

技术参数 储存条件4ºC，至少6个月 运输条件冰袋（wet ice）运输 染料组成DMAO EthD-III DMAO光谱特性Ex/Em=503/530nm (with DNA) EthD-III光谱特性Ex/Em=530/620nm (with DNA) 准确性与液体或固体培养基中的生长测定结果一致性高 产品形式染色试剂盒

实验类型 活细菌/死细菌染色实验检测细菌活力与细胞膜完整性

FAQ

Q1：菌悬液要怎么制备？

A：离心去除培养基，收集样本细菌，用 0.85% NaCl 溶液洗涤细胞 3 次（必须充分洗涤以去除培养基，残余的培养基会影响染色效果；不要用 PBS 等磷酸盐缓冲液洗涤，会影响染色效果）。然后用 0.85% NaCl 溶液制备细胞悬液。

Q：说明书上写的是一个视野可以看到两种颜色，而我同一激发光为什么看不到两种颜色，分开激发就可以，为什么？

A：有些显微镜是长通滤片，是可以观察到两种荧光；有的显微镜是短通滤片，不能同时观察到两种荧光的。若客户显微镜为短通道的滤片，建议客户分开激发和观察。

Q：两个染料受酯酶的影响吗？

A：不受

Q：说明书上写DMAO染色活细菌和死细菌于荧光显微镜或共聚焦显微镜下呈现绿色荧光，EthD-III染色膜受损的死细菌呈现红色荧光，那实际染色结果会是怎样的呢？

A：DMAO为膜透过性核酸染料可染色活细菌的DNA，其结合DNA的原理不能明确；EthD-III不具膜透过性仅可染色死细菌DNA，该染料为DNA插入型染料，具AT碱基偏好性（参考文献PMID:9016307）。在实际染色结果中会出现这样两种情况，且以下两种结果均为正常结果，原因是一方面染料结合DNA的情况，另一方面因细菌在染色液中的布朗运动：

1、红色荧光和绿色荧光出现共定位

在使用该试剂已发表的文献中参考PMID: 34161080，呈现红绿荧光共定位结果。

2、死细菌为红色荧光，活细菌及不健康细菌为绿色荧光，红色荧光和绿色荧光未呈现共定位。

Q：当用于染色细菌在共聚焦皿形成生物膜时，加入的染色液是否需要去除以及是否需要PBS buffer清洗？

A：染色液可以去除；可不进行PBS 清洗。

Documents & Citations

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