神经元细胞基础培养基（不含L-谷氨酰胺） Neuronal-Basal Medium

Q1:如何在Neurobasal培养基中使用L-谷氨酸盐？

A1:L-谷氨酸盐对成熟神经元具有兴奋毒性，需根据细胞类型差异化使用：

1)对于原代海马神经元及其他种类的胚胎神经元，我们推荐您在初始种板的培养基中加入25 µM L-谷氨酸盐(Cat#53667ES),4天之后停用。

2)对于神经母细胞瘤，接种和替换的培养基中需要含L-谷氨酰胺溶液(Cat#60757ES）。

Q2:为何需要使用完全培养基预先润洗所有材料？

A2:神经细胞随时都可能粘附于细胞培养皿和离心管的塑料上。因此，在使用前，所有将与细胞接触的材料均应使用培养基进行润洗，以防止细胞粘附于塑料上。

Q3:为何要逐滴加入培养基？

A3:避免渗透压急剧变化对细胞造成渗透冲击。

Q4:如何正确解冻B-27补充剂？

A4:推荐在4℃解冻过夜或室温静置2小时，不建议直接在37℃水浴中解冻。

Q5:神经元细胞存活率低，怎么办？

A5:可能神经元细胞在冻存复苏时受到压力

建议：1）避免细胞在复苏时，不会在37℃下暴露过长时间，待管底残留少量冰晶时即终止水浴。

2）复苏细胞之前，请用培养基预润湿所有塑料和玻璃耗材表面。

3）确保逐滴加入培养基，避免对细胞造成渗透冲击。

4）控制单次解冻数量，建议每次仅解冻1-2管，避免细胞在冻存培养基中长时间暴露，影响复苏后活力。